Melhorar a detecção de anticorpos do vírus da peste suína africana no soro

Avaliação de mAbs P22 por análise de Western blot e ensaio imunoenzimático de bloqueio (ELISA). A) Análise de Western blot da especificidade dos anticorpos monoclonais P22 (mAbs) para a proteína P22 alvo. A letra maiúscula entre dois números no canto inferior de cada imagem representa o nome do mAb, KDa =kilo Dalton, M =marcador, Lane-1 =proteína P22 recombinante carregada com 15 µl a uma concentração de 1 mg/ml e Lane- 2 =proteína de ligação à maltose (MBP) como controle negativo. Estes resultados mostraram que todos os mAbs eram altamente específicos e reconheceram a proteína P22 marcada com MBP no peso esperado de cerca de 66 KDa. B) Avaliação de sete P22-mAbs (3B7, 3F6, 3F7, 3F8, 3E9, 4A6 e 4B6) para sua aplicação no bloqueio de ELISA usando seis amostras de soro de porco positivas e quatro negativas para o vírus da peste suína africana (ASFV) e todas elas foram inibidos para ligar seu antígeno revestido alvo pelas amostras de soro positivas com IP médio> 92%. Os dados representam a média dos resultados de três experimentos independentes. Crédito:Biosegurança e Saúde (2022). DOI:10.1016/j.bsheal.2022.04.002

A peste suína africana (PSA) é uma doença altamente infecciosa e fatal dos suínos. Devido à complexidade do vírus ASF (ASFV) e várias formas clínicas da doença, é necessária uma ampla gama de ensaios de sorodiagnóstico altamente eficazes e robustos.
O uso das proteínas ASFV mais antigênicas é altamente crucial para melhorar os ensaios de sorodiagnóstico. Atualmente, apenas algumas proteínas recombinantes altamente antigênicas foram testadas e validadas para uso como reagentes em ensaios de sorodiagnóstico de PSA. Até agora, três kits ELISA baseados nas proteínas recombinantes P72, P30 e PP62 foram aprovados.

Em um novo estudo publicado em Biossegurança e Saúde com base na proteína P22 recombinante, um ensaio ELISA de bloqueio baseado em anticorpo monoclonal P22 altamente sensível, específico e rápido (mAb-bELISA) foi desenvolvido para detectar anticorpos séricos induzidos por ASFVs de genótipo I e II para detectar anticorpos ASFV. Um total de 806 amostras de soro de porco foram testadas para avaliar o desempenho do ensaio diagnóstico. O ensaio foi capaz de detectar anticorpos ASFV tão cedo quanto 9 dias após a infecção.

Com base neste estudo, o novo ensaio bELISA baseado em P22-mAb pode ser usado para detecção rápida e precisa de anticorpos contra ASFV, que desempenhará um papel valioso na contenção e prevenção de PSA como alternativa a outros métodos de diagnóstico sorológico. Além disso, este estudo ajudará os pesquisadores a investigar a importância imunogênica da proteína P22 na infecção por ASFV. + Explorar mais