Existem vários métodos para autenticar linhagens celulares não humanas, cada um com suas próprias vantagens e desvantagens. Aqui estão alguns métodos comumente usados:

1. Análise Morfológica :envolve examinar a linhagem celular ao microscópio para observar sua forma, tamanho e características de crescimento. Embora a análise morfológica possa ser útil para identificar características gerais de uma linha celular, nem sempre é suficiente para a autenticação definitiva.

2. Imunofenotipagem :Este método utiliza anticorpos para detectar a presença ou ausência de marcadores de superfície específicos ou proteínas intracelulares que são características de um determinado tipo de célula. A imunofenotipagem pode ser realizada utilizando técnicas como citometria de fluxo ou imunocitoquímica.

3. Cariótipo :Esta técnica envolve a análise do número de cromossomos e da estrutura de uma linhagem celular. O cariótipo pode identificar anomalias ou alterações cromossômicas que possam indicar contaminação ou identificação incorreta.

4. Impressão digital de DNA :Este método envolve a análise dos padrões únicos de DNA de uma linha celular usando técnicas como perfil de repetição curta em tandem (STR) ou análise de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP). A impressão digital de DNA pode fornecer um alto nível de discriminação e é amplamente utilizada para autenticação de linhagens celulares.

5. PCR específico para espécie :Este método utiliza a reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificar sequências específicas de DNA que são exclusivas da espécie de origem da linhagem celular. A PCR específica para espécies pode ser usada para detectar contaminação cruzada ou identificação incorreta de linhas celulares.

6. Análise de isoenzimas :Esta técnica envolve a análise da mobilidade eletroforética de isoenzimas, que são variantes de enzimas que diferem em sua estrutura e função molecular. A análise de isoenzimas pode ser usada para identificar contaminação ou identificação incorreta de linhas celulares com base em diferenças nos padrões de isoenzimas.

7. Teste de micoplasma :Os micoplasmas são um tipo de bactéria que pode contaminar culturas celulares e afetar seu comportamento e resultados experimentais. O teste de micoplasma é essencial para garantir que as linhas celulares estejam livres de contaminação por micoplasma.

É importante observar que a escolha do método de autenticação depende da linha celular específica e do nível de autenticação necessário. Algumas linhas celulares podem exigir vários métodos de autenticação para garantir identificação confiável e controle de qualidade. Além disso, a documentação adequada e a manutenção de registros do processo de autenticação são cruciais para manter a integridade das linhas celulares e garantir a reprodutibilidade na pesquisa.