Por John Brennan
Atualizado em 30 de agosto de 2022

Visão geral do método

A técnica de placas aglomeradas, iniciada por investigadores após a descoberta da penicilina por Fleming em 1928, continua a ser uma das estratégias mais antigas e mais acessíveis para detectar micróbios produtores de antibióticos em amostras ambientais.

Cultura em Pratos

Uma amostra de solo ou ambiental é diluída em série em água estéril e espalhada em placas de ágar ricas em nutrientes. Os cientistas selecionam placas que produzem uma alta densidade de colônias e depois inspecionam as colônias em busca de zonas claras de inibição ao redor das colônias vizinhas. Tais zonas indicam que um microrganismo pode estar secretando um composto que suprime o crescimento de seus vizinhos.

Isolamento e Purificação

Suspeitos produtores de antibióticos são colocados em placas frescas para obter colônias puras. As subculturas subsequentes confirmam se a inibição observada se deve a um composto antimicrobiano secretado ou apenas a uma alteração no pH local ou a outros factores ambientais. Os isolados puros são então cultivados em meio líquido para extração e caracterização bioquímica.

Vantagens

Esta abordagem é extremamente simples, requer apenas equipamento microbiológico padrão e pode produzir resultados dentro de dois a três dias. Permite uma triagem rápida contra organismos de teste, incluindo patógenos clinicamente relevantes, para avaliar o valor terapêutico potencial. A simplicidade do método o torna ideal para triagens preliminares de alto rendimento em laboratórios acadêmicos e industriais.

Limitações

Como o ensaio depende de inibição visível, ele detecta apenas compostos que agem rapidamente contra colônias próximas, negligenciando potencialmente agentes de ação mais lenta ou de espectro estreito. Os compostos identificados podem ter como alvo bactérias do solo, mas não patógenos humanos, e alguns podem ser tóxicos para células humanas. Além disso, apenas os microrganismos que iniciam a produção de antibióticos dentro do curto período de incubação são capturados, o que significa que os metabolitos de indução tardia ou condicionais permanecem ocultos.