Aqui está a ordem correta para a preparação padrão de uma amostra histológica:

1. Fixação:
* Esta é a primeira e mais crítica etapa.
* O objetivo é preservar a estrutura do tecido e impedir a decomposição.
* Fixativos comuns incluem formalina, glutaraldeído e álcool.

2. Desidratação:
* A água é removida do tecido usando uma série graduada de soluções de álcool (geralmente 70%, 90%, 95%e 100%).
* Isso prepara o tecido para incorporar a cera de parafina.

3. Limpeza:
* O álcool é removido do tecido e substituído por um solvente que é miscível com o álcool e a cera de parafina (por exemplo, xileno, tolueno ou histoclear).

4. Incorporação:
* O tecido é infiltrado com cera de parafina derretida sob vácuo.
* Esse processo permite que a cera permeia o tecido e solidifique, criando um bloco firme que pode ser seccionado.

5. Seção:
* O bloco de parafina é aparado e cortado em seções finas (normalmente 4-10 micrômetros de espessura) usando um microtomo.

6. Montagem:
* As seções são cuidadosamente montadas em lâminas de vidro, geralmente com um adesivo solúvel em água.

7. Desparafinização:
* A cera de parafina é removida das seções de tecido usando uma série de solventes (por exemplo, xileno, tolueno).

8. Reidratação:
* As seções de tecido são reidratadas através de uma série graduada de soluções de álcool (por exemplo, 100%, 95%, 90%, 70%e água).

9. Coloração:
* É aqui que os componentes do tecido são visualizados.
* Existem inúmeras manchas, cada uma com suas próprias propriedades e aplicações.
* Os exemplos incluem hematoxilina e eosina (H&E) para morfologia geral e manchas especiais para tipos ou estruturas específicas de células.

10. Montagem:
* As seções coradas são montadas com uma lamela e um meio de montagem (por exemplo, DPX, Permount).

11. Rotulagem:
* Os slides são rotulados com informações relevantes (nome do paciente, data, tipo de tecido, mancha).

Nota: Este é um protocolo padrão. Pode haver variações, dependendo do tipo de tecido específico, técnicas de coloração e aplicações de pesquisa.