A tecnologia de DNA emprega vários métodos para transferir genes bacterianos de uma célula para outra. Aqui está um colapso das técnicas comuns:

1. Transformação:

* Mecanismo : Este é um processo natural em que as bactérias podem retirar o DNA nu de seu ambiente.
* Procedimento:
* As bactérias são tratadas com um produto químico (como cloreto de cálcio) ou um breve choque elétrico (eletroporação) para tornar suas paredes celulares mais permeáveis.
* O gene desejado (geralmente clonado em um plasmídeo) é então adicionado às bactérias.
* Algumas bactérias ocupam o DNA, incorporando -o ao seu próprio genoma ou mantê -lo como um plasmídeo separado.
* Vantagens: Simples e relativamente barato.
* Desvantagens: Nem todas as bactérias são naturalmente competentes (capazes de assumir o DNA).

2. Transdução:

* Mecanismo : Um bacteriófago (um vírus que infecta bactérias) atua como um vetor, transportando DNA bacteriano de uma célula para outra.
* Procedimento:
* O fago infecta uma bactéria doadora, pegando fragmentos do DNA do doador.
* O fago então infecta uma bactéria receptor, transferindo o DNA adquirido.
* Vantagens: Altamente eficiente na transferência de genes específicos.
* Desvantagens: Requer fagos especializados para cada espécie bacteriana.

3. Conjugação:

* Mecanismo : Transferência direta de DNA de uma bactéria para outra através de uma conexão física (PILUS).
* Procedimento:
* As bactérias doadoras possuem um fator de fertilidade (fator F) que lhes permite formar um pilus, conectando -se a bactérias receptoras.
* O fator F pode ser incorporado ao cromossomo bacteriano, permitindo a transferência de genes cromossômicos.
* Vantagens: Permite a transferência de grandes fragmentos de DNA.
* Desvantagens: Requer equipamentos e técnicas especializadas.

4. Métodos de transformação artificial:

* Eletroporação: Um breve pulso elétrico cria poros na membrana celular, permitindo que o DNA entre.
* Microinjeção: O DNA é injetado diretamente na célula bacteriana usando uma agulha fina.
* Entrega mediada por lipossoma: O DNA é encapsulado em lipossomas (vesículas lipídicas) que se fundem com a membrana celular bacteriana, fornecendo o DNA dentro.

Considerações importantes:

* Seleção de vetores: Escolher o vetor apropriado (plasmídeo, fago ou outro) depende do tamanho do gene, das bactérias do hospedeiro e do resultado desejado.
* Marcadores de seleção: Os genes que proporcionam resistência a antibióticos ou outras características selecionáveis ​​são frequentemente incorporadas aos vetores para distinguir bactérias transformadas dos não transformados.
* Expressão do gene : Após a transferência, o gene introduzido precisa ser expresso nas bactérias do destinatário. Isso geralmente exige que elementos regulatórios (promotores, terminadores) estejam presentes no vetor.

Esses métodos de tecnologia de DNA são ferramentas cruciais para engenharia genética, pesquisa e biotecnologia. Eles nos permitem entender as funções bacterianas, desenvolver novos medicamentos e até criar organismos com características desejáveis.