Unidade de eletroforese em gel vertical:uma máquina de separação

Uma unidade de eletroforese em gel vertical é um dispositivo usado em biologia e bioquímica molecular para separar moléculas, principalmente proteínas e ácidos nucleicos (DNA e RNA) , com base no tamanho e carga .

Aqui está um detalhamento de seus principais recursos:

1. Componentes:

* Bandeja de fundição em gel: Isso mantém o gel, que é uma matriz porosa que atua como meio de separação.
* placas de vidro: Duas placas de vidro vertical ensanam o gel, criando um canal estreito para a migração da amostra.
* Câmaras de buffer: Eles contêm o tampão de eletroforese, que conduz eletricidade e mantém o pH do sistema.
* eletrodos : Um par de eletrodos (ânodo e cátodo) gera um campo elétrico que aciona as moléculas através do gel.
* Fonte de alimentação: Fornece uma corrente direta aos eletrodos, criando o campo elétrico para separação.
* pente: Isso é usado para criar poços no gel, onde as amostras são carregadas.

2. Princípio de trabalho:

* O gel é normalmente feito de poliacrilamida (Página) ou agarose , com densidades variadas para controlar o tamanho dos poros.
* As amostras são carregadas em poços na parte superior do gel.
* Quando um campo elétrico é aplicado, as moléculas migram através do gel em direção ao eletrodo com a carga oposta (positivo para moléculas carregadas negativamente e vice -versa).
* moléculas menores migram mais rápido Através dos poros do gel, enquanto moléculas maiores encontram mais resistência e se movem mais lentamente.
* Isso resulta em bandas de separação Com base no tamanho, com as menores moléculas na parte inferior e a maior na parte superior.

3. Aplicações:

* Análise de proteínas : Determinando o tamanho, pureza e presença da proteína.
* Análise de DNA : Sequenciamento, análise de polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição (RFLP) e clonagem.
* Análise de RNA : Avaliando a expressão gênica e estudando a estrutura do RNA.

4. Vantagens:

* alta resolução: Fornece uma separação clara de moléculas com pequenas diferenças de tamanho.
* Versatilidade: Adequado para vários tipos de amostras e aplicações.
* Análise quantitativa: A intensidade da banda pode ser usada para medir a quantidade de cada molécula.

5. Limitações:

* Configuração do complexo: Requer preparação cuidadosa e atenção aos detalhes.
* demorado: O processo de eletroforese pode levar várias horas.
* Capacidade limitada: O tamanho do gel restringe o número de amostras que podem ser executadas simultaneamente.

No geral, a unidade de eletroforese em gel vertical é uma ferramenta essencial para pesquisadores em vários campos, fornecendo informações valiosas sobre a composição e as características das moléculas biológicas.