A eletroforese é uma técnica usada para separar moléculas com base em sua carga e tamanho. Aqui estão os principais componentes usados para medir na eletroforese:
1. Sistema de eletroforese: * Gel: Os tipos mais comuns são agarose e poliacrilamida. Os géis de agarose são usados para moléculas maiores, enquanto os géis de poliacrilamida são usados para moléculas menores.
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buffer: Uma solução eletrolítica que conduz eletricidade e mantém o pH do gel.
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Fonte de alimentação: Fornece a corrente elétrica que impulsiona a migração de moléculas.
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pente: Cria poços no gel onde as amostras são carregadas.
2. Preparação de amostra: *
amostra: Pode ser DNA, RNA, proteínas ou outras moléculas que você deseja separar.
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Carregando corante: Contém um corante de rastreamento que permite monitorar o progresso da eletroforese e uma solução densa para ajudar a amostra a afundar no poço.
3. Detecção e análise: *
mancha: Usado para visualizar as moléculas separadas. As manchas comuns incluem:
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brometo de etídio (ETBR) para DNA e RNA (fluoresces sob luz UV)
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Coomassie Blue para proteínas
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sistema de imagem: Um sistema que pode capturar e analisar o gel corado, como um transiluminador UV, sistema de documentação de gel ou scanner.
* Software
: Para analisar os resultados, medir o tamanho da banda e calcular pesos moleculares.
4. Outros equipamentos: *
pipetas: Usado para carregar com precisão amostras nos poços de gel.
* Micropipeta: Uma pequena pipeta que mede volumes muito pequenos de líquido.
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Luvas: Para proteger suas mãos de produtos químicos e manchas.
Medições -chave na eletroforese: *
Distância da migração: A distância percorrida por uma molécula do poço para sua posição final no gel.
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Mobilidade: Uma medida de quão rápido uma molécula se move em um campo elétrico.
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peso molecular: O tamanho da molécula, que pode ser estimado com base em sua distância de migração em relação aos padrões conhecidos.
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Concentração: A quantidade de uma molécula presente em uma amostra, que pode ser medida pela intensidade da banda manchada.
Usando este equipamento e seguindo protocolos estabelecidos, os cientistas podem efetivamente separar e analisar biomoléculas usando eletroforese.