Há uma variedade de testes que podem ser usados para identificar e caracterizar proteínas. Alguns dos testes mais comuns incluem:
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SDS-PAGE (eletroforese em gel de dodecilsulfato de sódio-poliacrilamida) :Este teste separa as proteínas com base no seu tamanho e carga. As proteínas são primeiro tratadas com SDS, que as desnatura e lhes confere uma carga negativa. Eles são então submetidos à eletroforese através de um gel de poliacrilamida, que atua como uma peneira molecular. Proteínas menores migram mais rapidamente através do gel do que proteínas maiores.
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Western blotting :Este teste é usado para identificar proteínas específicas em uma amostra. As proteínas são primeiro separadas por SDS-PAGE e depois transferidas para uma membrana de nitrocelulose. A membrana é então incubada com anticorpos específicos para a proteína de interesse. Se os anticorpos se ligarem à proteína, será produzido um sinal colorimétrico ou fluorescente.
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Imunoensaio :Este teste é usado para medir a concentração de uma proteína específica em uma amostra. Os anticorpos específicos para a proteína de interesse são imobilizados num suporte sólido, tal como uma placa de microtitulação. A amostra é então adicionada à placa e qualquer proteína presente na amostra se ligará aos anticorpos. A quantidade de proteína ligada pode ser quantificada medindo a absorvância ou fluorescência da placa.
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Espectrometria de massa :Este teste é usado para identificar e caracterizar proteínas com base na sua relação massa/carga (m/z). As proteínas são primeiro digeridas em peptídeos menores, que são então separados por cromatografia líquida. Os peptídeos são então ionizados e analisados por um espectrômetro de massa. O m/z de cada peptídeo pode ser usado para identificar a proteína da qual ele veio.
Estes são apenas alguns dos muitos testes que podem ser usados para estudar proteínas. A escolha do teste dependerá das necessidades específicas do pesquisador.
