Para preparar Tris base 20 mM de solução de 50 mL, você precisará de:
1. Tris(hidroximetil)aminometano (base Tris)
2. Água desionizada
3. Medidor de pH ou tiras indicadoras de pH
4. Balanço analítico
5. Balão volumétrico (50 mL)
Procedimento:
1. Pese 0,6057 gramas de base Tris usando uma balança analítica.
Este cálculo pode ser feito através da fórmula:
Massa da base Tris (g) =Concentração (mM) x Volume da solução (L) x Peso molecular da base Tris (g/mol) Nesse caso:
Massa da base Tris (g) =20 mM x 0,050 L x 121,14 g/mol =0,6057 g
2. Transfira a base Tris pesada para um balão volumétrico de 50 mL.
3. Adicione uma pequena quantidade de água desionizada (aproximadamente 30-40 mL) para dissolver a base Tris.
4. Agite suavemente o frasco para misturar e dissolver completamente a base Tris.
5. Verifique o pH da solução usando um medidor de pH ou tiras indicadoras de pH. O pH de uma solução base Tris 20 mM deve ser aproximadamente 8,0-8,5.
6. Se necessário, ajuste o pH da solução adicionando pequenas quantidades de ácido clorídrico (HCl) ou hidróxido de sódio (NaOH).
Nota:A base Tris é uma base fraca, por isso se dissolve facilmente em água. No entanto, se observar quaisquer partículas não dissolvidas, você pode aquecer suavemente a solução para ajudá-las a se dissolverem.
6. Depois que o pH estiver ajustado e a solução bem misturada, adicione mais água deionizada para levar o volume final até 50 mL.
7. Misture bem agitando suavemente o frasco.
Sua solução base Tris 20 mM agora está pronta para uso. Armazene a solução em temperatura ambiente ou leve à geladeira, se desejar.