Por Elliot Walsh, atualizado em 24 de março de 2022

As bactérias são os organismos mais prolíficos do planeta, com mais de um trilhão de espécies e mais de cinco milhões de trilhões de trilhões indivíduos. Embora menos de 1% destes micróbios causem doenças nos seres humanos, podem variar desde ligeiras dores de estômago até infecções potencialmente fatais, como a peste bubónica, que matou cerca de 50 milhões de pessoas no século XIV.

Antibióticos e seus mecanismos de ação

Os antibióticos visam seletivamente estruturas e processos bacterianos, poupando as células humanas. As aulas comuns incluem:

• Beta‑lactâmicos (por exemplo, penicilina) interrompem a síntese da parede celular, levando à lise bacteriana.
• Macrólidos (por exemplo, eritromicina) ligam-se aos ribossomos bacterianos, bloqueando a síntese de proteínas.
• Quinolonas interfere na replicação do DNA ao inibir a girase e a topoisomerase IV.

Testando resistência a antibióticos

Desde a década de 1920, as bactérias desenvolveram resistência, levando ao desenvolvimento de ensaios de suscetibilidade padronizados. Os primeiros métodos envolviam diluições em série de culturas bacterianas em placas carregadas de antibióticos, o que era demorado e variável.

Teste de difusão em disco Kirby‑Bauer

Padronizado pelos microbiologistas W.M.M.Kirby e A.W.Bauer, o teste Kirby‑Bauer continua sendo o padrão ouro para triagem de resistência rápida e confiável. O procedimento é simples:

1. Coloque um isolado bacteriano puro em uma placa de ágar.
2. Coloque discos carregados de antibióticos na superfície; cada disco contém um antibiótico específico.
3. Incubar a placa em condições ideais.

À medida que o antibiótico se difunde para fora, as bactérias suscetíveis são inibidas, criando uma área clara e circular sem crescimento ao redor de cada disco – conhecida como zona de inibição. O tamanho desta zona reflete diretamente a sensibilidade bacteriana:zonas maiores indicam maior suscetibilidade; zonas menores sugerem resistência.

Medindo a zona de inibição

A medição precisa é crítica para a interpretação dos resultados. Siga estas etapas:

1. Coloque a placa de ágar em uma superfície não reflexiva.
2. Usando uma régua milimetrada ou paquímetro, posicione a marca zero no centro do disco de antibiótico.
3. Meça do centro do disco até a borda externa da zona de inibição (raio). Multiplique por dois para obter o diâmetro ou meça diretamente na zona (diâmetro).

Todas as medidas devem ser registradas em milímetros (mm).

Use as tabelas de referência do CLSI para interpretar o diâmetro relativo às espécies bacterianas e aos antibióticos. Esses gráficos podem ser encontrados aqui .