Os pesquisadores suspeitavam que o DNA não codifique diretamente as proteínas por causa de algumas evidências importantes:

1. Discrepância de localização:

* O DNA foi encontrado principalmente no núcleo das células, enquanto a síntese de proteínas ocorreu no citoplasma. Essa separação espacial sugeriu que uma molécula intermediária era necessária para transportar as informações genéticas do núcleo para os ribossomos no citoplasma onde são feitas proteínas.

2. Diferenças químicas:

* O DNA é uma cadeia longa de nucleotídeos composta por açúcar deoxirribose, grupos fosfato e bases nitrogenadas adenina, guanina, citosina e timina.
* As proteínas são feitas de aminoácidos, um tipo completamente diferente de molécula. As diferenças estruturais entre DNA e proteínas fizeram parecer improvável que um pudesse se traduzir diretamente no outro.

3. O "dogma central" da biologia molecular:

* Nos primeiros dias da biologia molecular, os cientistas já estavam começando a entender o papel do RNA em vários processos celulares.
* Surgiu o conceito de "dogma central", sugerindo que a informação genética flui do DNA para o RNA e a proteína. Essa idéia, embora ainda seja refinada hoje, forneceu uma estrutura para entender a relação entre essas moléculas.

4. Observações experimentais:

* Experiências nas décadas de 1950 e 1960, principalmente por François Jacob e Jacques Monod, mostraram que as moléculas de RNA estavam envolvidas na síntese de proteínas.
* Esses pesquisadores descobriram o RNA mensageiro (mRNA), que transporta o código genético do DNA no núcleo para os ribossomos no citoplasma.

5. A complexidade da síntese de proteínas:

* O processo de síntese de proteínas é altamente complexo, exigindo várias etapas e diferentes tipos de moléculas de RNA (mRNA, tRNA, rRNA). Essa complexidade sugeriu uma via mais indireta do que uma tradução direta do DNA para a proteína.

Essas linhas de evidência levaram os pesquisadores a supor que uma molécula intermediária, como o RNA, deve estar envolvida na tradução do código genético do DNA em proteínas. Esta hipótese foi posteriormente confirmada pela descoberta do mRNA e pela elucidação do processo de transcrição e tradução.