Expressão e purificação da proteína:uma explicação simplificada
Expressão de proteínas
é o processo de criação de uma proteína a partir de seu código genético. Isso envolve a
transcrição do gene no RNA mensageiro (mRNA) e a tradução subsequente
do mRNA em uma proteína.
purificação de proteínas é o processo de isolar e purificar uma proteína específica de uma mistura de proteínas. Isso envolve separar a proteína desejada de outras proteínas, células e outros contaminantes.
Aqui está um detalhamento de cada processo:
Expressão da proteína
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Gene de interesse: Este é o gene que codifica a proteína que você deseja produzir.
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Sistema de expressão: Este é um organismo vivo (como bactérias, leveduras ou células de mamíferos) que é usado para expressar o gene.
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vetor: Esta é uma pequena molécula de DNA que carrega o gene de interesse no sistema de expressão.
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transcrição: A sequência de DNA do gene é copiada no mRNA.
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Tradução: A sequência de mRNA é usada como um modelo para montar a proteína dos aminoácidos.
purificação de proteínas: *
lise celular: As células que contêm a proteína expressa estão abertas para liberar a proteína.
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Purificação inicial: Esta etapa remove grandes contaminantes como detritos celulares.
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Purificação específica: Esta etapa usa técnicas que visam a proteína específica com base em suas propriedades (tamanho, carga, afinidade).
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Purificação final: Esta etapa refina ainda mais a pureza da proteína.
Por que esses processos são importantes? *
Pesquisa: Estudar a estrutura e a função das proteínas.
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Biotecnologia: Produzir proteínas para aplicações terapêuticas, diagnósticas e industriais.
Exemplos: *
Produção de insulina: A insulina humana é produzida expressando o gene da insulina nas bactérias e depois purificando a proteína.
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Produção de anticorpos: Os anticorpos são produzidos expressando o gene do anticorpo nas células de mamíferos e depois purificando a proteína.
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Produção de enzimas: As enzimas são usadas em vários processos industriais e são frequentemente produzidos expressando o gene enzimático em bactérias ou leveduras e depois purificando a proteína.
em resumo: Expressão e purificação proteica são processos essenciais em biologia molecular, biotecnologia e pesquisa farmacêutica. Eles permitem que os cientistas estudem e produzam proteínas para várias aplicações, desde pesquisas básicas até o desenvolvimento de novos medicamentos e terapias.