Quais moléculas estão presentes nas células que podem interferir na extração de DNA?
Muitas moléculas nas células podem interferir na extração de DNA, e elas podem ser amplamente categorizadas como:
1. Enzimas: * nucleases
: Essas enzimas quebram o DNA. Existem dois tipos principais:
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dnases: Especificamente degradar o DNA.
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rnases: Degradar o RNA, mas também pode clicar o DNA sob certas condições.
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proteases: Essas enzimas quebram as proteínas, que podem se ligar ao DNA e dificultar o isolado.
2. Polímeros: *
polissacarídeos: Esses carboidratos podem formar géis pegajosos que prendem o DNA. Exemplos incluem glicogênio em células animais e amido em células vegetais.
* proteínas
: Como mencionado, as proteínas podem se ligar ao DNA e impedir sua extração.
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lipídios: Gorduras e óleos podem interferir na precipitação do DNA e dificultar a remoção da solução.
3. Outros componentes celulares: *
celulose e lignina: Estes são componentes estruturais das paredes celulares da planta e podem ser difíceis de remover, dificultando o isolamento do DNA.
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Metabólitos secundários: Esses compostos podem ser produzidos por plantas e animais e interferem na extração de DNA. Exemplos incluem taninos, alcalóides e pigmentos.
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Sais: Altas concentrações de sais podem interromper a precipitação do DNA e impedir sua purificação.
4. Contaminação: *
DNA microbiano: O DNA de bactérias, fungos ou outros microorganismos pode contaminar amostras.
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DNA ambiental: O DNA de fontes como solo, água ou ar também pode contaminar amostras.
Para enfrentar esses desafios, os protocolos de extração de DNA geralmente incluem etapas que: * células lyse: Para abrir a membrana celular e liberar o DNA.
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inativar enzimas: Através do tratamento térmico, inibidores químicos ou interrupção mecânica.
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Remova substâncias interferentes: Por filtração, precipitação ou outros métodos.
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Purifique o DNA: Usando técnicas como precipitação de etanol ou cromatografia em coluna.
É importante considerar o tipo específico de célula e a aplicação pretendida ao escolher um método de extração de DNA apropriado.