Os cientistas usam uma variedade de técnicas para isolar organelas específicas. Aqui estão alguns dos métodos mais comuns:

1. Fracionamento celular:

* Esta é uma técnica clássica que envolve homogeneizando (quebrando as células abertas), seguido de centrifugação diferencial .
* homogeneização pode ser alcançado usando vários métodos, como mistura, sonicação ou uso de uma imprensa francesa.
* centrifugação diferencial Separa os componentes celulares com base em seu tamanho e densidade. As organelas mais pesadas (como núcleos) sedimentos primeiro em velocidades mais baixas, enquanto organelas mais claras (como ribossomos) sedimentos em velocidades mais altas.

2. Centrifugação do gradiente de densidade:

* Essa técnica refina o fracionamento celular, colocando um gradiente de soluções com crescente densidade (por exemplo, sacarose) em uma amostra de células homogeneizadas.
* As organelas migram para a camada de densidade que corresponde à sua própria densidade, permitindo uma purificação adicional.

3. Citometria de fluxo:

* Essa técnica usa vigas a laser para analisar e classificar células individuais com base em suas propriedades de tamanho, forma e fluorescência.
* Pode ser usado para isolar tipos de células específicos que contêm a organela desejada.

4. Imunoprecipitação:

* Essa técnica usa anticorpos para se ligar especificamente às proteínas alvo associadas a organelas específicas.
* Ao adicionar contas revestidas com os anticorpos, a organela que contém a proteína alvo pode ser retirada da solução.

5. Separação magnética:

* Essa técnica usa contas magnéticas revestidas com anticorpos contra proteínas específicas de organelas.
* As contas se ligam às organelas alvo, permitindo que elas sejam extraídas usando um ímã.

6. Cromatografia em afinidade:

* Esta técnica usa uma coluna embalada com um ligante específico que se liga à organela alvo.
* As organelas se ligam ao ligante, enquanto outros componentes celulares passam pela coluna.

7. Microfluídica:

* Essa técnica usa dispositivos microfluídicos para manipular e separar células e organelas com base em propriedades de tamanho, forma e superfície.

A escolha da técnica depende da organela específica isolada e da pureza e quantidade desejadas.