Aqui está um colapso dos principais passos dos primeiros passos que os cientistas deram para produzir bactérias transgênicas que fizeram insulina:

1. Isolando o gene da insulina humana:

* Identificando o gene: Os pesquisadores primeiro tiveram que identificar a sequência exata de DNA que codifica a insulina humana. Isso envolveu estudar o genoma humano e entender a estrutura da proteína de insulina.
* clonando o gene: Uma vez identificados o gene, eles usaram técnicas como enzimas de restrição e plasmídeos para cortar o gene da insulina do DNA humano e inseri -lo em um pequeno pedaço de DNA circular chamado plasmídeo. Isso criou uma molécula de DNA recombinante.

2. Escolhendo um host bacteriano adequado:

* e. coli como o cavalo de trabalho: A bactéria * Escherichia coli * (E. coli) foi escolhida como organismo hospedeiro. É uma bactéria bem estudada, facilmente manipulada e rapidamente reproduzida, tornando-a ideal para a produção em larga escala.

3. Inserindo o gene em bactérias:

* Transformação: O plasmídeo recombinante contendo o gene da insulina humana foi introduzido nas células de E. coli. Esse processo, chamado de transformação, envolveu a criação de condições em que as bactérias adotariam o plasmídeo.

4. Selecionando para bactérias transgênicas:

* Resistência ao antibiótico: O plasmídeo geralmente continha um gene para a resistência a antibióticos. Isso permitiu que os pesquisadores identificassem facilmente bactérias que haviam adotado o plasmídeo com sucesso. Eles cultivavam as bactérias na presença do antibiótico, e apenas as bactérias com o plasmídeo sobreviveriam.

5. Expressando o gene da insulina:

* promotores e regulamentação: O plasmídeo foi projetado para que o gene da insulina humana fosse expresso (ativado) dentro da E. coli. Isso envolveu, incluindo uma sequência promotora - uma região de DNA que diz ao mecanismo bacteriano para começar a ler e transcrever o gene da insulina.

6. Produção e purificação de insulina:

* Fermentação em larga escala: As bactérias transgênicas de E. coli foram cultivadas em grandes tanques de fermentação, permitindo que eles produzam grandes quantidades de insulina.
* Purificação: Após a fermentação, a insulina produzida pelas bactérias precisava ser purificada do restante dos componentes bacterianos. Isso envolveu várias técnicas, como cromatografia e filtração.

Nota importante: Esta é uma visão geral simplificada. O processo envolveu numerosos detalhes técnicos, iterações e desafios, e muitos cientistas brilhantes contribuíram para seu sucesso.