A sacarose
não desempenham um papel direto no isolamento do DNA do sangue humano. Seu uso primário está em centrifugação com gradiente de densidade , uma técnica usada para separar diferentes componentes celulares, incluindo DNA, com base em sua densidade.
Aqui está como funciona:
1.
Preparação da amostra de sangue: A amostra de sangue é tipicamente tratada com um tampão de lise para abrir as células e liberar seu conteúdo, incluindo DNA.
2.
centrifugação: A amostra lisada é então centrifugada em alta velocidade, criando um gradiente de densidade.
3.
gradiente de sacarose: Uma solução de sacarose é colocada em camadas na parte superior da amostra lisada. Esta solução possui um gradiente de aumento da concentração de sacarose, criando um gradiente de crescente densidade.
4.
Separação: Durante a centrifugação, diferentes componentes celulares migrarão para posições no gradiente, onde sua densidade corresponde à concentração de sacarose circundante. O DNA, sendo relativamente denso, se estabelecerá em uma camada específica dentro do gradiente.
5. Coleção: A camada que contém o DNA é então coletada e purificada para remover os contaminantes restantes.
Portanto, a sacarose não está diretamente envolvida na quebra das células ou no isolamento do próprio DNA. Em vez disso, atua como um meio de densidade de densidade Facilitar a separação do DNA de outros componentes celulares.
Nota importante: Embora a sacarose seja usada em alguns protocolos de isolamento de DNA, outros métodos podem utilizar diferentes meios de gradiente de densidade, como o cloreto de césio (CSCL).