Parâmetros para o crescimento da cultura de células animais:

A cultura de células animais é um processo complexo e delicado, exigindo um controle cuidadoso de vários parâmetros para o crescimento ideal. Estes podem ser amplamente categorizados da seguinte forma:

1. Parâmetros físicos:

* Temperatura: A maioria das linhas celulares de mamíferos prospera a 37 ° C. Isso é crucial para a atividade enzimática ideal e os processos celulares.
* ph: As células requerem um ambiente ligeiramente alcalino, geralmente entre 7,2 e 7,4. Isso é mantido usando buffers na mídia.
* umidade: A alta umidade (normalmente cerca de 95%) é essencial para evitar a evaporação e manter o volume correto da mídia.
* Composição de gás: As células precisam de oxigênio para respiração e CO2 para manter o pH. Isso geralmente é fornecido pela incubação de células em uma incubadora umidificada com CO2 a 5%.
* Área de superfície: As células requerem área de superfície suficiente para fixação e crescimento. Isso é alcançado através de vários métodos, como frascos, placas de vários poços ou micro-alvo.

2. Composição da mídia:

* Nutrientes básicos: O meio deve conter nutrientes essenciais, como aminoácidos, vitaminas, glicose e sais, para apoiar o crescimento e o metabolismo celular.
* Fatores de crescimento: Alguns tipos de células requerem fatores de crescimento específicos, como insulina ou fator de crescimento epidérmico (EGF), para estimular a proliferação.
* Soro : O soro é frequentemente adicionado à mídia para fornecer nutrientes e fatores de crescimento essenciais, bem como proteínas para fixação e proteção. No entanto, o soro é uma mistura complexa e indefinida, que pode introduzir variabilidade e potenciais contaminantes.
* buffers: Buffers como bicarbonato ou HEPES são usados ​​para manter a estabilidade do pH.
* Antibióticos : Às vezes, são adicionados antibióticos para evitar contaminação bacteriana, mas também podem afetar o crescimento celular e devem ser usados ​​com cautela.
* Outros aditivos: Dependendo da linha e aplicação celular, outros aditivos podem ser necessários, como agentes quelantes ou anti-oxidantes.

3. Fatores específicos da linha celular:

* Número de passagem: As células têm uma vida útil finita e suas características de crescimento mudam com o aumento do número de passagem.
* Frequência da subcultura: A frequência de divisão das células (subcultura) depende da linha celular e de sua taxa de crescimento.
* Densidade de semeadura: O número inicial de células semeadas em um vaso de cultura afeta o crescimento e a morfologia celular.
* fatores de estresse: As células podem ser enfatizadas por fatores como superlotação, depleção de nutrientes ou flutuações de pH, que podem afetar negativamente o crescimento.

4. Técnica asséptica:

* esterilidade: Manter um ambiente estéril é crucial para impedir que a contaminação de bactérias, fungos ou vírus. Isso envolve o uso de equipamentos e procedimentos estéreis.
* Prevenção de contaminação: O monitoramento regular de contaminação e o uso de técnicas apropriadas de esterilização são essenciais para a cultura celular bem -sucedida.

5. Equipamento:

* incubadora: Uma incubadora umidificada que mantém a temperatura correta e a composição do gás.
* Capa da cultura de células: Um exaustor de fluxo laminar fornece um ambiente estéril para o manuseio de células.
* Microscópios : Os microscópios são essenciais para visualizar a morfologia celular e avaliar o crescimento.
* pipetas e recipientes estéreis: Eles são necessários para manusear e transferir meios de cultura de células e células.

Ao controlar cuidadosamente todos esses parâmetros, você pode criar um ambiente ideal para a cultura de células animais, permitindo um crescimento eficiente e experimentos bem -sucedidos. No entanto, lembre -se de que cada linha celular possui requisitos e sensibilidades exclusivas, exigindo otimização adicional e protocolos especializados para o crescimento ideal.