A centrifugação desempenha um papel crucial no isolamento do DNA, separando diferentes componentes de uma amostra com base em sua densidade . Veja como é usado em vários estágios:
1. Lise celular: *
quebrar células abertas: A centrifugação é usada para quebrar células abertas (como células sanguíneas, bactérias ou células vegetais) para liberar o DNA. Isso pode ser feito através de métodos físicos como vórtice ou sonicação, mas a centrifugação ajuda a separar os detritos celulares do DNA liberado.
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Remoção de detritos celulares: Após a lise, a amostra é centrifugada a uma velocidade relativamente baixa. Detritos celulares mais pesados, organelas e proteínas se instalam no fundo, formando um pellet, enquanto o DNA permanece no sobrenadante (o líquido acima do sedimento).
2. Precipitação de DNA: *
separando o DNA da solução: Depois que o DNA é precipitado da solução (geralmente usando etanol ou isopropanol), a centrifugação a uma velocidade mais alta é usada para gritar o DNA. O pellet é então lavado com uma solução como etanol para remover os contaminantes restantes.
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Concentração: A centrifugação também pode ser usada para concentrar o DNA, girando um grande volume de solução em um volume menor. Isso é útil ao trabalhar com pequenas quantidades de DNA.
3. Purificação: *
Removendo contaminantes: A centrifugação é usada para remover contaminantes como proteínas, lipídios e RNA, que geralmente estão presentes ao lado do DNA. Diferentes protocolos de centrifugação com velocidades e buffers específicos são usados para separar seletivamente esses contaminantes.
em resumo: *
Disrupção de células e remoção de detritos: A centrifugação separa os detritos celulares do DNA liberado.
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precipitação e concentração do DNA: A centrifugação grita o DNA e ajuda a concentrá -lo.
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Purificação: A centrifugação separa os contaminantes do DNA, levando a uma amostra de DNA mais limpa e concentrada.
Ao usar uma combinação dessas técnicas, a centrifugação desempenha um papel vital para garantir o isolamento e a purificação bem -sucedidos do DNA.
