Para preparar tampão fosfato 0,05M de pH 6,8, você precisará do seguinte:
Materiais: - Água destilada
- Dihidrogenofosfato de sódio (NaH2PO4)
- Hidrogenofosfato de sódio (Na2HPO4)
- medidor de pH
- Agitador magnético
- Cilindro graduado
- Balão volumétrico de 1L
- Os produtos químicos devem ser de grau reagente analítico.
Procedimento: 1.
Calcule os valores necessários: Determine as quantidades de NaH2PO4 e Na2HPO4 necessárias usando a equação de Henderson-Hasselbalch:
pH =pKa + log ([A-]/[HA])
onde:
- pH é o pH desejado (6,8)
- pKa é a constante de dissociação ácida de H2PO4- (7.21)
- [A-] é a concentração da base (Na2HPO4)
- [HA] é a concentração do ácido (NaH2PO4)
Reorganizando a equação, você obtém:
[Na2HPO4]/[NaH2PO4] =10^(pH - pKa)
Insira os valores:
[Na2HPO4]/[NaH2PO4] =10^(6,8 - 7,21) =0,1995
2.
Prepare as soluções estoque: a)
Solução estoque de NaH2PO4 (0,1M): Pesar 1,1998 g de NaH2PO4 e dissolver em água destilada em balão volumétrico de 100 mL. Misture bem para obter uma solução estoque de NaH2PO4 0,1M.
b)
Solução estoque de Na2HPO4 (0,1M): Pesar 1,4196 g de Na2HPO4 e dissolver em água destilada em balão volumétrico de 100 mL. Misture bem para obter uma solução estoque de Na2HPO4 0,1M.
3.
Prepare o tampão fosfato: Usando um cilindro graduado, transfira 10 mL da solução estoque de NaH2PO4 0,1 M e 19,95 mL da solução estoque de Na2HPO4 0,1 M para um balão volumétrico de 1L. Certifique-se de que as soluções estejam à temperatura ambiente.
4.
Ajuste o pH: Use um agitador magnético para misturar bem a solução no frasco. Enquanto agita, use um medidor de pH para medir o pH da solução tampão. Se necessário, adicione pequenos volumes de soluções estoque de NaH2PO4 ou Na2HPO4 até que o pH desejado de 6,8 seja alcançado.
5.
Complete até a marca: Assim que o pH estiver ajustado para 6,8, adicione água destilada até a marca de 1L no balão volumétrico. Misture bem para garantir uma solução homogênea.
6.
Verifique novamente o pH: Finalmente, verifique novamente o pH do tampão fosfato preparado para garantir que esteja dentro da faixa desejada de 6,8 ± 0,05.
Observação: Para garantir um pH preciso, calibre o medidor de pH antes de usar e armazene o tampão fosfato a uma temperatura adequada (4°C) para manter a sua estabilidade.