O HPLC oferece um método rápido, automatizado e altamente preciso para identificar determinados componentes químicos em uma amostra, mas pode ser caro, complexo e não funciona para todas as amostras. Os laboratórios médicos, forenses, ambientais e de fabricação usam a técnica para quantificar e separar os produtos químicos em uma amostra. A HPLC tem vantagens e desvantagens em comparação com outras técnicas.
HPLC e técnicas similares
Como outras formas de cromatografia, a HPLC permite a separação de constituintes químicos através do uso de uma fase móvel e uma fase estacionária. A fase móvel é líquida e a fase estacionária é sólida. Como os diferentes componentes se movem em velocidades diferentes, eles se separam. Técnicas alternativas incluem eletroforese capilar, onde as substâncias migram através de soluções em um campo elétrico e outros métodos cromatográficos, como extração em fase sólida, cromatografia em fase gasosa e cromatografia em camada fina.
Velocidade, eficiência e precisão
Comparado a outros técnicas cromatográficas, como TLC, HPLC é extremamente rápido e eficiente. Ele usa uma bomba, em vez da gravidade, para forçar um solvente líquido através de um material adsorvente sólido, com diferentes componentes químicos se separando à medida que se movem em velocidades diferentes. O processo pode ser concluído em aproximadamente 10 a 30 minutos e oferece alta resolução. É preciso e altamente reproduzível. Por ser amplamente automatizada, as execuções básicas de HPLC podem ser realizadas com treinamento mínimo.
Custo e Complexidade
Apesar de suas vantagens, a HPLC pode ser cara, exigindo grandes quantidades de produtos orgânicos caros. Técnicas como extração em fase sólida e eletroforese capilar podem ser mais baratas e ainda mais rápidas, especialmente para análises sob boas práticas de fabricação. Embora seja relativamente fácil usar os métodos existentes de HPLC, pode ser complexo solucionar problemas ou desenvolver novos métodos. Isso ocorre principalmente devido à variedade de módulos, colunas e fases móveis.
Sensibilidade e resolução
Em geral, a HPLC é versátil e extremamente precisa quando se trata de identificar e quantificar componentes químicos. Com muitas etapas envolvidas, a precisão da HPLC se deve em grande parte ao processo de automatização e, portanto, altamente reprodutível. A HPLC tem baixa sensibilidade para certos compostos e alguns não podem ser detectados, pois são absorvidos irreversivelmente. Substâncias voláteis são melhor separadas por cromatografia em fase gasosa.
