No topo, uma sequência mostra o projeto de tinturas tio-engaioladas projetadas na Rice University para serem acionadas pela luz visível. No fundo, imagem confocal e de super-resolução de uma gota de lipídeo em adipócitos vivos incubados com BODIPY (verde), SNile Red (vermelho) e Hoechst 33342 (azul), seguida de fotoativação com laser de 561 nm. Barra de escala:10 μm. Barra de escala para imagem de super-resolução de gotículas de lipídios rotuladas com SNile Red, canto inferior direito:1 μm. Crédito:Xiao Lab / Rice University
Bastou a substituição de um átomo para que os cientistas da Rice University dessem novos poderes às moléculas fluorescentes biocompatíveis.
O laboratório de arroz do químico Han Xiao relatou no Jornal da American Chemical Society ela desenvolveu um interruptor de átomo único para ligar e desligar os corantes fluorescentes usados em imagens biológicas.
A técnica permitirá imagens de alta resolução e rastreamento dinâmico de processos biológicos em células vivas, tecidos e animais.
O laboratório Rice desenvolveu uma sonda minimamente modificada que pode ser acionada por uma ampla gama de luz visível. O processo patenteado pode substituir os fluoróforos fotoativáveis existentes que só podem ser ativados com luz ultravioleta ou requerem produtos químicos tóxicos para ligar a fluorescência, características que limitam sua utilidade.
Os pesquisadores aproveitaram um fenômeno conhecido como transferência de elétrons foto-induzida (PET), que já era conhecido por extinguir os sinais fluorescentes.
Eles colocam fluoróforos em gaiolas de tiocarbonil, a moeity responsável pela têmpera. Com a síntese orgânica de uma etapa, eles substituíram um átomo de oxigênio na gaiola por um de enxofre. Isso lhes permitiu induzir o efeito PET para extinguir a fluorescência.
O disparo do complexo novamente com luz visível perto da absorvância preferida da molécula fluorescente oxidou a gaiola, por sua vez. Isso eliminou o enxofre e o substituiu por um átomo de oxigênio, restaurando a fluorescência.
"Tudo o que precisamos para fazer isso é um pouco de química e um passo, "disse Xiao, que se juntou a Rice em 2017 com financiamento do Instituto de Pesquisa e Prevenção do Câncer do Texas (CPRIT). “Demonstramos no artigo que funciona da mesma forma para uma variedade de corantes fluorescentes. Basicamente, uma reação resolve muitos problemas. "
Pesquisadores em todo o mundo usam moléculas fluorescentes para marcar e rastrear células ou elementos dentro das células. Ativar as tags com luz visível de baixa potência em vez de ultravioleta é muito menos prejudicial para as células em estudo, Xiao disse, e torna possíveis as longas exposições de células vivas exigidas por imagens de super-resolução. Experimentos de super-resolução de Theodore Wensel, a cadeira Robert A. Welch em Química no Baylor College of Medicine, e sua equipe confirmou suas habilidades, ele disse.
"Sentimos que esta será uma sonda muito boa para imagens de células vivas, "Disse Xiao." As pessoas também usam corante fotoativável para rastrear a dinâmica das proteínas, para ver onde, quão longe e com que velocidade eles viajam. Nosso trabalho era fornecer um simples, maneira geral de gerar esse corante. "
Os pesquisadores descobriram que sua técnica funcionava em uma ampla gama de marcadores fluorescentes comuns e poderia até mesmo ser misturada para imagens multicoloridas de moléculas-alvo em uma única célula.