A geração da mistura metabólica de Fase I de um fármaco é seguida pela separação cromatográfica dos metabólitos. Uma divisão direciona o eluente para MS para identificação do composto e para nanofracionamento em uma placa de 384 poços para bioensaio. Finalmente, um cromatograma de bioensaio é reconstruído e a comparação com dados de MS obtidos em paralelo é realizada. Crédito:Jeroen Kool
Um novo (e disponível gratuitamente) artigo de pesquisa original de Barbara M. Zietek et al., agora disponível antes da impressão em SLAS Discovery Conectados, apresenta um rápido, metodologia robusta e precisa para correlacionar a identidade do composto com a potência CYP1A2 dos inibidores em misturas metabólicas.
A metodologia é centrada em torno de uma plataforma de nanofracionamento em linha em que uma mistura metabólica é separada cromatograficamente seguida por análise de espectrometria de massa (MS) on-line paralela e nanofracionamento em linha em placas de microtitulação de alta densidade que são então diretamente expostas a um bioensaio.
A correlação de cromatogramas de bioatividade reconstruídos com dados de MS permite a identificação direta de compostos com propriedades inibidoras em relação às enzimas CYP1A2, indicando interações medicamentosas envolvidas no CYP. De maneira semelhante, a metodologia pode ser implementada no ensaio de misturas metabólicas para outros CYPs relevantes na descoberta de medicamentos. Ao lado do tradicional perfil metabólico Met-ID, a abordagem apresentada neste novo artigo fornece perfis diretos da contribuição relativa de cada metabólito para a atividade testada, neste caso, a inibição do CYP1A2.
As interações medicamentosas causadas pela inibição das enzimas CYP450 (ou CYPs) podem levar a reações adversas graves nos pacientes. Estas propriedades inibidoras podem ser exibidas por compostos originais e por seus metabólitos. Juntos, as propriedades de um ou mais metabólitos podem superar os benefícios de um candidato a medicamento, levando assim ao seu fracasso na fase de desenvolvimento do fármaco ou retirada do mercado farmacêutico após sua introdução.
Nos últimos anos, aumentos no desgaste do medicamento (candidato) são vistos especialmente nos estágios finais do desenvolvimento do medicamento. Esse processo pode ser melhorado com a implementação de novos métodos de triagem que avaliem rapidamente as propriedades biológicas / bioquímicas e as correlacionem diretamente às identidades dos compostos. Isso pode fornecer rapidamente perfis de propriedades farmacocinéticas de um medicamento e seus metabólitos, juntamente com suas propriedades biológicas, e pode ser obtido pela metodologia apresentada neste artigo.
