Eletroforese é uma técnica usada na clonagem, mas
não diretamente no próprio processo de clonagem . É uma ferramenta poderosa usada para analisar os fragmentos de DNA envolvidos na clonagem. Aqui está como funciona:
1. Análise do fragmento de DNA: *
Digestão da enzima de restrição: Durante a clonagem, você usa enzimas de restrição para reduzir seu DNA de interesse e o vetor (plasmídeo) em sequências específicas. Isso gera fragmentos de DNA de tamanhos variados.
* Eletroforese em gel: Os fragmentos de DNA são então separados com base em seu tamanho usando eletroforese em gel. Uma matriz de gel (geralmente agarose) é usada e uma corrente elétrica é aplicada. Fragmentos menores viajam mais rápido e mais longe pelo gel do que fragmentos maiores.
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Visualização: Os fragmentos de DNA são visualizados usando um corante que se liga ao DNA e fluoresces sob luz UV. Isso permite que você veja as diferentes bandas de DNA no gel, representando os diferentes tamanhos dos fragmentos de DNA.
2. Usos na clonagem: *
Verificação do resumo da restrição: A eletroforese ajuda a garantir que as enzimas de restrição cortassem seu DNA com sucesso nos locais corretos e que o vetor tenha os locais de restrição corretos para a ligação.
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Analisando clones: Após a ligação (juntando -se à inserção do DNA com o vetor), a eletroforese é usada para verificar se a ligação foi bem -sucedida. Você pode comparar o tamanho da molécula de DNA recombinante com o fragmento de DNA e o vetor original.
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Bibliotecas de triagem: A eletroforese pode ser usada para analisar as inserções de DNA em uma biblioteca de clones, ajudando a identificar clones com a inserção desejada.
em resumo: A eletroforese não faz parte do próprio processo de clonagem do núcleo, mas é uma ferramenta analítica essencial para verificar as diferentes etapas e garantir que o experimento de clonagem seja bem -sucedido.