O papel de um host de clonagem na tecnologia de DNA recombinante
Um hospedeiro de clonagem é um organismo vivo, geralmente uma bactéria, levedura ou mesmo uma célula vegetal, que é usada para
replicar e expressar A molécula de DNA recombinante. Isso significa que ele desempenha um papel crucial em todo o processo de tecnologia de DNA recombinante. Aqui está como:
1. Replicação: * O host de clonagem fornece as enzimas e máquinas necessárias para replicar a molécula de DNA recombinante. Isso inclui polimerase de DNA, ligase e outras enzimas essenciais para a replicação do DNA.
* O origem da replicação do próprio host
Permite a replicação autônoma da molécula de DNA recombinante, gerando várias cópias.
2. Expressão: * O host de clonagem contém a máquina de transcrição e tradução necessária para expressar o gene inserido na molécula de DNA recombinante. Isso significa que a célula hospedeira pode ler o código genético no DNA recombinante e produzir a proteína desejada.
* Os ribossomos do host e outros fatores de tradução são essenciais para a síntese de proteínas.
* Elementos regulatórios específicos, como promotores e terminadores, presentes no vetor, garantem que o gene seja expresso corretamente no host.
3. Seleção e amplificação: * Os hosts de clonagem geralmente possuem
marcadores selecionáveis , genes que conferem resistência a antibióticos ou outros agentes seletivos. Isso permite que os pesquisadores identifiquem e selecionem facilmente as células hospedeiras que adotaram com sucesso o DNA recombinante.
* Ao cultivar as células hospedeiras transformadas em um meio seletivo, apenas as células que contêm o DNA recombinante sobreviverão e se multiplicarão, levando à amplificação
do gene desejado.
4. Produção do produto desejado: * O gene clonado pode ser expresso na célula hospedeira para produzir a proteína desejada ou outra molécula.
* Esta proteína pode ser colhida para várias aplicações, como tratamentos médicos, aplicações industriais ou fins de pesquisa.
em resumo: O hospedeiro de clonagem atua como uma fábrica para a produção da proteína ou molécula desejada codificada pelo DNA recombinante. Ele fornece as ferramentas necessárias para replicar o DNA, expressar o gene e produzir o produto final. A escolha do host de clonagem é crucial e depende de fatores como o tipo de gene, o produto de proteína desejado e a aplicação específica.
Exemplos de hosts de clonagem: * Bactérias
: *E. Coli* é o hospedeiro de clonagem mais amplamente utilizado devido à sua facilidade de crescimento, taxa de replicação rápida e genética bem caracterizada.
* Feracho: * Saccharomyces cerevisiae* é usado para produzir proteínas que requerem modificações pós-traducionais.
* células de mamíferos: As células CHO e as células HEK293 são usadas para expressar proteínas eucarióticas complexas.
Ao entender o papel dos hosts de clonagem na tecnologia de DNA recombinante, podemos apreciar a complexa interação de fatores que nos permitem manipular informações genéticas e aproveitar seu potencial para diversas aplicações.