O ensaio de proteína Bio-Rad (também conhecido como ensaio de Bradford) não mede na verdade a proteína total a 595 nm. É um ensaio colorimétrico onde a absorvância é medida a 595 nm . Aqui está o porquê:

* Coomassie Blue Blue G-250 Dye: O ensaio usa esse corante, que se liga às proteínas. Essa ligação altera a estrutura do corante e causa uma mudança em seu espectro de absorvância.
* Mudança de cor: Quando o corante se liga à proteína, ele muda de cor de marrom para azul. Esta forma azul tem uma absorvância máxima a 595 nm.
* quantificação de proteína: A intensidade da cor azul é diretamente proporcional à quantidade de proteína presente. Ao medir a absorvância a 595 nm, podemos quantificar a concentração de proteínas.

em resumo:

* O ensaio Bio-Rad usa o corante Blue G-2550 Coomassie Blue G-250 para se ligar a proteínas.
* O corante ligado fica azul e absorve no máximo a 595 nm.
* A absorvância a 595 nm é medida para determinar a concentração de proteína.

Portanto, enquanto a absorvância é medida a 595 nm, não é a proteína total que está sendo medida diretamente, mas a mudança de cor causada pela ligação do corante às proteínas.