Ao considerar o direcionamento do RNA mensageiro (mRNA) para degradação como uma abordagem terapêutica, é crucial direcionar seletivamente as moléculas específicas de mRNA associadas à doença ou condição de interesse. Esta seletividade é essencial para evitar consequências indesejadas e potenciais efeitos fora do alvo.

Várias estratégias são empregadas para atingir o direcionamento seletivo do mRNA:

1. Tecnologia siRNA (Small Interfering RNA):
- As moléculas de siRNA são sequências curtas de RNA de fita dupla projetadas para atingir e silenciar genes específicos, induzindo a degradação do mRNA.
- o siRNA pode ser modificado quimicamente para aumentar a estabilidade e a entrega às células alvo.
- Cada siRNA é projetado para atingir uma sequência específica de mRNA, permitindo o direcionamento preciso de genes associados a doenças.

2. Oligonucleotídeos antisense (ASOs):
- ASOs são sequências sintéticas de DNA ou RNA de fita simples que são complementares ao mRNA alvo.
- Quando os ASOs se ligam ao seu mRNA alvo, podem bloquear a sua tradução em proteína ou induzir a sua degradação.
- Os ASOs podem ser modificados quimicamente para melhorar a estabilidade, a resistência à nuclease e a absorção celular.

3. Ácidos Nucleicos Peptídicos (PNAs):
- PNAs são imitadores sintéticos de DNA compostos de estruturas semelhantes a peptídeos e bases de nucleotídeos.
- Os PNAs podem se ligar ao mRNA com alta afinidade e seletividade de sequência, inibindo a tradução do mRNA ou promovendo sua degradação.
- Os PNAs melhoraram a estabilidade e a resistência à nuclease em comparação com os ácidos nucleicos naturais.

4. Proteínas de ligação ao RNA (RBPs):
- RBPs são proteínas que se ligam a sequências específicas de RNA e regulam a sua expressão.
- Ao manipular RBPs para reconhecer e se ligar ao mRNA alvo, é possível interferir na sua estabilidade ou tradução.
- As abordagens baseadas em RBP podem fornecer um controle mais direcionado e ajustável da regulação do mRNA.

5. Sistemas CRISPR-Cas:
- Os sistemas CRISPR-Cas, particularmente a interferência CRISPR (CRISPRi), foram adaptados para atingir e silenciar genes específicos, bloqueando seletivamente a transcrição ou promovendo a degradação do mRNA.
- CRISPRi utiliza proteínas Cas desativadas fundidas a repressores transcricionais ou enzimas que degradam RNA para obter o silenciamento genético direcionado.

Em cada uma dessas abordagens, a especificidade do direcionamento de mRNA é alcançada projetando a molécula terapêutica (por exemplo, siRNA, ASO, PNA, RBP ou RNA guia CRISPR) para ser complementar à sequência única do mRNA alvo. Esta complementaridade de sequência assegura a ligação selectiva ao ARNm desejado e minimiza os efeitos fora do alvo.

Projeto cuidadoso, testes rigorosos e estudos de validação são essenciais para garantir que a terapêutica direcionada ao mRNA modele seletiva e eficazmente a expressão dos genes pretendidos, levando aos resultados terapêuticos desejados.