Por que algumas vezes nós usamos azul e vermelho com o sistema de iluminação de um microscópio óptico?
Você provavelmente está pensando em
microscopia de fluorescência , onde a luz azul e vermelha são usadas em combinação, mas não como a fonte de iluminação para o próprio microscópio.
Aqui está o colapso:
1. Iluminação: *
Luz branca é a fonte de iluminação primária na maioria dos microscópios ópticos, incluindo microscópios de fluorescência. Ilumina a amostra que está sendo vista.
2. Fluorescência: * Na microscopia de fluorescência
, corantes específicos (chamados fluoróforos) são usados para rotular a amostra. Esses corantes emitem luz de uma cor específica quando excitados pela luz de uma cor diferente.
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luz azul é frequentemente usado para excitar proteínas fluorescentes verdes (GFP) , que são comumente usados como marcadores genéticos.
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luz vermelha é frequentemente usado para excitar proteínas fluorescentes vermelhas (RFP) ou outros corantes que emitem fluorescência vermelha.
3. Filtros: * O microscópio usa filtros para separar a luz de excitação da fluorescência emitida.
* filtro de excitação: Esse filtro permite apenas o comprimento de onda específico da luz que excita o fluoróforo.
* filtro de emissão
: Esse filtro permite apenas o comprimento de onda específico da luz emitida pelo fluoróforo para alcançar o observador.
Veja como funciona: 1. Excitação: A luz azul é direcionada para a amostra, excitando as moléculas GFP dentro da amostra.
2.
emissão: As moléculas excitadas de GFP emitem luz verde.
3.
filtragem: A luz de excitação vermelha é bloqueada por um filtro de emissão, permitindo que apenas a fluorescência verde atinja o olho do observador ou a câmera.
Por que usar azul e vermelho? *
cores distintas: A luz azul e vermelha é escolhida para seus comprimentos de onda distintos, permitindo que eles excitem e detectem diferentes fluoróforos. Isso permite a visualização de vários alvos em uma única amostra.
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Separação espectral: A luz azul e vermelha está relativamente distante no espectro eletromagnético, facilitando o filtro de comprimentos de onda indesejados e isolam a fluorescência específica.
em resumo: * A luz azul e vermelha é usada na microscopia de fluorescência para excitar diferentes fluoróforos, mas não como a fonte de iluminação primária.
* Os filtros são essenciais para separar a luz de excitação da fluorescência emitida, permitindo a visualização de alvos específicos dentro de uma amostra.