Muitas reações bioquímicas são naturalmente lentas, a menos que sejam catalisadas por enzimas que aumentam sua taxa de reação. A cinética enzimática mede a taxa de reação enzimática do substrato único usando a equação de Michaelis-Menten, v = [S] Vmax /[S] Km. A equação de Michaelis-Menten, batizada em homenagem à bioquímica Leonor Michaelis e ao médico Maud Menten, "descreve a relação entre a taxa de conversão do substrato por uma enzima (V) e a concentração do substrato ([S])", segundo o Davidson College. Site de Química. Com base nesta equação, a curva de Michaelis-Menten pode ser traçada com o eixo x representando [S] em milimoles e o eixo y representando V em segundos /micromole.
Entendendo a Equação de Michaelis-Menten
Entenda o propósito de cada valor na equação e o que ele representa. V é a taxa de conversão ou a taxa de reação, [S] é a concentração de substrato, Vmax é a taxa máxima de conversão e Km (a constante de Michaelis) é a concentração de substrato na qual a taxa de conversão é metade da Vmax. br>
Encontre os valores para cada variável na equação. [S] é a concentração conhecida para o substrato sendo analisado, e a alteração deste valor afetará a taxa da reação catalisada por enzima. Os valores de Km e Vmax são geralmente listados com o substrato também em termos de milimoles e seg-1 quando dados em um problema.
Resolva a equação apropriada para cada valor se os valores não forem dados. De acordo com o site da Mills College Biochemistry, comece com a equação de estado estacionário k1 [Efree] [S] = (k-1 + k2) [ES]. Defina Km usando a equação Km-1 = k1 /(k-1 + k2). Resolva para [ES] usando a equação [ES] = [S] [Et] /(Km + [S]) para obter [Ef] e [S]. Use [Ef] para definir Vmax usando a equação vmax = kcat [Et]. Consulte um manual ou livro-texto de bioquímica no nível universitário para obter instruções detalhadas sobre como resolver cada uma dessas equações e para definições específicas de cada variável.
Insira Km, [S] e Vmax na equação de Michaelis-Menten e resolva V, a velocidade ou taxa de reação.
Plotando a curva de Michaelis-Menten
Usando papel milimetrado, desenhe um eixo xey. Rotule o eixo x mM de [S] ou concentração de substrato. Identifique y axsec /micro-mole de V ou velocidade de reação.
Insira valores diferentes de [S] na equação de Michaelis-Menten, juntamente com os valores encontrados para Km e Vmax, para resolver V.
Plote os valores para [S] no eixo x e os valores correspondentes resolvidos para V no eixo y. O gráfico deve se parecer com uma hipérbole retangular, onde concentrações mais altas de substrato equivalem a reações enzimáticas mais rápidas.
