A coloração primária usada na técnica de coloração ácido-resistente de Ziehl-Neelsen, que é comumente empregada para detectar a presença de bactérias ácido-resistentes, como Mycobacterium tuberculosis, é a carbol fucsina. No entanto, um contracorante também é usado neste procedimento para fornecer contraste e aumentar a visibilidade de organismos não ácido-resistentes. O contracorante normalmente empregado no método Ziehl-Neelsen é o azul de metileno.
Aqui estão as funções do contracorante na coloração ácido-resistente:
1. Coloração diferencial:A contracoloração ajuda a diferenciar entre bactérias ácido-resistentes e não-ácido resistentes. As bactérias ácido-resistentes retêm a coloração primária (carbol fucsina) mesmo após extensa lavagem com ácido-álcool, devido à sua composição única de parede celular, rica em ácidos micólicos. Em contraste, as bactérias não ácido-resistentes perdem facilmente a coloração primária durante esta etapa.
2. Contraste de cores:O contracorante confere uma cor contrastante aos organismos não ácido-resistentes, permitindo que sejam facilmente distinguidos das bactérias ácido-resistentes vermelhas ou rosa. O azul de metileno é comumente usado como contracorante porque cora efetivamente as bactérias não ácido-resistentes de azul, criando uma distinção visual clara.
3. Visualização aprimorada:Ao fornecer contraste de cores, o contracorante aumenta a visibilidade geral de microrganismos não ácido-resistentes na preparação corada. Isto facilita a identificação e observação de diferentes tipos de bactérias presentes na amostra.
4. Coloração de fundo:A contracoloração também ajuda a fornecer cor de fundo à lâmina, facilitando a localização e a diferenciação de células bacterianas individuais.
5. Informações Adicionais:Em alguns casos, o contracorante pode fornecer informações adicionais sobre as características das bactérias não ácido-resistentes. Por exemplo, certas contra-colorações podem revelar a presença de componentes ou estruturas celulares específicas que podem auxiliar na identificação e classificação adicionais.
No geral, a contracoloração na técnica de coloração ácido-resistente de Ziehl-Neelsen contribui para a visualização, diferenciação e identificação eficazes de bactérias ácido-resistentes, fornecendo contraste e destacando microrganismos não-ácido-resistentes na amostra.