Durante a cromatografia em camada fina, um técnico coloca manchas de uma mistura química em uma placa plana revestida com uma camada de material absorvente e, em seguida, assenta a parte inferior da placa em solvente. À medida que o solvente sobe a placa, os produtos químicos na mistura sobem a velocidades diferentes, então eles se separam. Este teste pode determinar quais produtos químicos estão em uma mistura, comparando as taxas de viagem de incógnitas aos padrões conhecidos. Os resultados, no entanto, podem ser afetados por muitos fatores.

Fatores de Retenção

O fator de retenção para um produto químico durante a cromatografia de camada fina é uma medida de quanto ele sobe na placa em resposta a o movimento do solvente. Como o movimento absoluto do produto químico dependerá de quanto o solvente foi permitido, os valores do fator de retenção são calculados em relação ao grau de movimento do solvente. O fator de retenção para um produto químico é a distância vertical movida pelo produto químico do local onde foi originalmente aplicado à placa, dividido pela distância percorrida pelo solvente - medida a partir do mesmo ponto inicial.

Camada fina Placa de Cromatografia

A placa de cromatografia em camada fina pode afetar o valor do fator de retenção obtido para um determinado produto químico. As placas de cromatografia de camada fina podem ser revestidas com uma variedade de sólidos absorventes; mais freqüentemente sílica ou alumina. Uma vez que o fator de retenção é baseado na afinidade relativa do produto químico para o absorvente comparado ao solvente, a alteração do absorvente pode alterar significativamente o fator de retenção. Além disso, a espessura e a uniformidade da camada de absorvente podem variar de placa para chapa, especialmente se forem feitas à mão, o que às vezes é o caso. Esses dois fatores também podem alterar o valor do fator de retenção para produtos químicos.

Solventes

Como o solvente carrega o produto químico na placa, o solvente específico usado também terá um impacto substancial no fator de retenção. valor para o produto químico. Um solvente que tenha uma interacção mais forte para um determinado produto químico ultrapassará mais facilmente qualquer afinidade do produto químico para a camada absorvente, e moverá esse químico para mais longe num dado período de tempo. Misturas de solventes também podem ter efeitos diferentes dependendo da proporção de cada solvente.

Outros fatores

Existem alguns outros fatores que podem afetar o fator de retenção em alguns casos. A temperatura do solvente e placa pode fazer pequenas mudanças, uma vez que, por exemplo, o solvente pode muitas vezes dissolver melhor os produtos químicos que está transportando a temperaturas mais altas. A técnica do técnico na aplicação da amostra na placa também pode alterar o fator de retenção. Um efeito potencial é que a aplicação de muita amostra resultará em bandas grandes e difusas de produtos químicos subindo pela placa, dificultando a medição precisa da distância percorrida pelo produto químico.