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    Detecção de doping genético CRISPR / Cas
    p Crédito:American Chemical Society

    p Todos os atletas querem estar no topo de seu jogo quando competem, mas alguns recorrem a abordagens nefastas para atingir o pico de crescimento muscular, velocidade e agilidade. Desenvolvimentos recentes na tecnologia de edição de genes podem levar os atletas a mudar seu DNA para obter uma vantagem. Agora, pesquisadores relatando em ACS ' Química Analítica demonstram os primeiros passos para detectar este tipo de dopagem tanto no plasma humano quanto em camundongos vivos. p O método de edição de genes denominado CRISPR / Cas é uma forma popular de os cientistas alterarem com precisão o DNA em muitos organismos, e recentemente ganhou ainda mais atenção quando os principais desenvolvedores do método receberam o Prêmio Nobel de Química de 2020. Com este método, os pesquisadores adicionam uma molécula de RNA e uma proteína às células. A molécula de RNA guia a proteína para a sequência de DNA apropriada, e então a proteína corta o DNA, como uma tesoura, para permitir alterações. Apesar das preocupações éticas que foram levantadas sobre a aplicação potencial do método em humanos, alguns atletas podem ignorar os riscos e usá-lo indevidamente para alterar seus genes. Porque CRISPR / Cas muda DNA, é considerado "doping genético" e é proibido pela Agência Mundial Antidoping, uma organização internacional independente. Um método suficiente para detectar a edição do gene CRISPR / Cas precisa ser desenvolvido, Contudo. Então, Mario Thevis e seus colegas queriam ver se eles poderiam identificar a proteína mais provável a ser usada neste tipo de doping, Cas9 da bactéria Streptococcus pyogenes (SpCas9), em amostras de plasma humano e em modelos de camundongos.

    p A equipe espalhou a proteína SpCas9 no plasma humano, em seguida, isolou a proteína e corte-a em pedaços. Quando as peças foram analisadas por espectrometria de massa, os pesquisadores descobriram que podiam identificar com sucesso componentes únicos da proteína SpCas9 da complexa matriz plasmática. Em outro experimento, SpCas9 inativado, que pode regular a expressão do gene sem alterar o DNA, foi adicionado a amostras de plasma humano. Com uma ligeira modificação, o método permitiu que a equipe purificasse e detectasse a forma inativa. Finalmente, a equipe injetou SpCas9 em camundongos e mostrou que suas concentrações atingiam o pico no sangue circulante após 2 horas e podiam ser detectadas em até 8 horas após a administração no tecido muscular. Os pesquisadores afirmam que, embora ainda haja muito trabalho a ser feito, este é um passo inicial em direção a um teste para identificar os atletas que estão tentando obter uma vantagem injusta.




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