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O corpo humano hospeda cerca de nove vezes mais células bacterianas do que células humanas. Em microbiologia, uma cultura pura refere-se a uma preparação de laboratório – como uma placa de Petri – que contém uma única espécie bacteriana. Identificar e isolar essas espécies é essencial para uma caracterização precisa e aplicações a jusante.

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1. Esterilize a alça de inoculação

Acenda um bico de Bunsen e passe a alça de inoculação pela parte mais quente da chama até que fique vermelha. Esta etapa elimina quaisquer micróbios residuais.

2. Pegue bactérias

Deixe a alça esfriar por cerca de 10 segundos e depois mergulhe-a suavemente na amostra microbiana.

3. Primeira sequência

Abra a placa de ágar e passe o laço para frente e para trás em aproximadamente um terço da superfície da placa. Reesterilize a alça na chama.

4. Segunda sequência

Toque a alça em uma região não inoculada do ágar para resfriá-la. Gire a placa de forma que a seção inoculada fique à esquerda ou à direita e, em seguida, deslize a alça pela área inoculada e pelo terço superior da superfície restante várias vezes. Reesterilize a alça.

5. Terceira Sequência

Resfrie a alça em uma área limpa do ágar, gire a placa mais 90° e arraste a alça através da zona previamente inoculada antes de varrer a área não inoculada restante.

6. Incubar a placa

Coloque a placa numa incubadora (ou à temperatura ambiente) e espere até aparecerem colónias visíveis – normalmente 24 a 48 horas ou mais, dependendo do organismo.

7. Transfira as bactérias isoladas

Reesterilize uma nova alça de inoculação. Toque-o em uma única colônia bem formada na placa e, em seguida, transfira-o para um tubo inclinado de ágar ou para um tubo de caldo nutriente.

8. Incubar a Cultura Pura

Incubar a inclinação ou caldo nas mesmas condições de antes. Após crescimento suficiente, a cultura será uma preparação bacteriana pura.

Coisas necessárias

• Amostra microbiana
• Alça de inoculação
• Queimador de Bunsen
• Placa de ágar
• Tubo inclinado de ágar ou caldo nutriente

TL;DR (muito longo; não li)

Riscar uma placa em estágios sucessivos dilui a carga bacteriana, permitindo a formação de colônias individuais. Evite contaminação cruzada excessiva entre zonas de listras. A incubação pode ocorrer à temperatura ambiente, mas o uso de uma incubadora controlada otimiza as condições de crescimento para o organismo específico.

Aviso

Ao trabalhar com microrganismos desconhecidos, a segurança é fundamental:use luvas, esterilize completamente as superfícies após a exposição e certifique-se de que a alça de inoculação seja esterilizada antes e depois de cada etapa.

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