As enzimas de restrição, também conhecidas como endonucleases de restrição, são proteínas que cortam o DNA em sequências específicas. Aqui está como eles funcionam:

1. Sequência de reconhecimento:

* Especificidade: Cada enzima de restrição reconhece uma sequência curta específica de nucleotídeos de DNA. Esta sequência é tipicamente 4-8 pares de bases de comprimento e é chamada de sequência de reconhecimento ou Site de restrição .
* Natureza palindrômica: Muitas seqüências de reconhecimento são palindrômicas, o que significa que lêem as mesmas para trás e para frente nas cadeias de DNA opostas. Por exemplo, a enzima Ecori reconhece a sequência GAATTC, que é a mesma se você a ler da direita para a esquerda na fita complementar (CTTAAG).

2. Clivagem:

* Corte: Uma vez que a enzima de restrição encontra sua sequência de reconhecimento, ela corta a molécula de DNA em um ponto específico dentro dessa sequência.
* Ends pegajosos vs. Ends Blunt: A maneira como uma enzima de restrição corta pode produzir "pontas pegajosas" ou "pontas robustas".
* Ends pegajosos: A enzima corta os fios de DNA em posições diferentes, deixando saliências curtas de fita simples que podem parecer base com saliências complementares de outras moléculas de DNA cortadas com a mesma enzima. Isso é útil para criar moléculas de DNA recombinantes.
* termina robusta: A enzima corta os dois fios de DNA na mesma posição, não deixando saliências.

em resumo:

Os seguintes fatores determinam como uma enzima de restrição reduzirá o DNA:

* A sequência de reconhecimento específica da enzima.
* A localização dessa sequência dentro da molécula de DNA.
* O padrão específico de clivagem da enzima (pontas pegajosas vs. extremidades robustas).

Exemplo:

A enzima Ecori corta o DNA na sequência Gaattc, produzindo extremidades pegajosas. Isso significa que ele cortará qualquer molécula de DNA contendo essa sequência, e os fragmentos de DNA resultantes terão saliências de fita simples que podem ser usadas para clonagem ou outras manipulações genéticas.