Princípio da eletroforese:
A eletroforese é uma técnica usada para separar moléculas carregadas com base no tamanho, forma e carga
sob a influência de um campo elétrico. Funciona sobre os seguintes princípios:
1. Cobrança: * Moléculas com
cargas opostas para o eletrodo migrará em direção a ele. Por exemplo, moléculas carregadas negativamente migram para o eletrodo positivo (ânodo) e moléculas carregadas positivamente migram para o eletrodo negativo (cátodo).
* A magnitude
da carga também desempenha um papel; As moléculas com cargas mais altas migram mais rapidamente.
2. Tamanho e forma: * Moléculas menores migram
mais rápido do que moléculas maiores através da matriz de gel.
*
forma também influencia a migração; Moléculas alongadas experimentam mais atrito do que moléculas compactas.
3. Matriz em gel: * A matriz de gel atua como um meio de peneiração , permitindo que moléculas menores passem mais facilmente.
* Diferentes tipos de géis (agarose, poliacrilamida) têm tamanhos de poros diferentes, permitindo a separação com base no tamanho.
Como funciona a eletroforese: 1.
Preparação da amostra: A amostra que contém as moléculas a serem separadas é carregada no gel.
2.
aplicação de campo elétrico: Uma corrente elétrica é aplicada em todo o gel, criando um campo elétrico.
3.
Migração: As moléculas carregadas migram através da matriz de gel em direção ao eletrodo com a carga oposta.
4.
Separação: As moléculas se separam com base em sua carga, tamanho e forma, formando bandas distintas.
5.
Visualização: As bandas separadas são visualizadas usando manchas ou outros métodos de detecção.
Aplicações da eletroforese: A eletroforese é amplamente utilizada em vários campos, incluindo:
*
Biologia molecular: Separação e análise de DNA, RNA e proteínas.
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Bioquímica: Estudando estrutura, função e interações proteicas.
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medicamento: Diagnóstico e monitoramento de distúrbios genéticos, infecções e câncer.
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forense: Profiling de DNA e teste de paternidade.
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ciência alimentar: Análise de componentes alimentares e detecção de adulteração.
Em resumo, a eletroforese utiliza os princípios de carga, tamanho e forma para separar moléculas sob a influência de um campo elétrico. Essa técnica versátil encontra aplicações em vários campos para diversos fins, tornando -a uma ferramenta fundamental na ciência moderna.