Quais moléculas são usadas para extrair o gene de interesse e o DNA de recombina?
Aqui está um colapso das moléculas envolvidas na extração e recombinação de DNA, juntamente com seus papéis:
1. Extraindo o gene de interesse *
Enzimas de restrição: Essas enzimas agem como uma tesoura molecular, reconhecendo sequências específicas de DNA e cortando a molécula de DNA nesses locais. Isso cria fragmentos contendo o gene desejado.
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vetores: São moléculas de DNA que atuam como portadoras para o gene de interesse. Os tipos comuns incluem plasmídeos (pequenas moléculas de DNA circular encontradas em bactérias) e vetores virais (vírus modificados usados para fornecer material genético).
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enzimas ligase: Essas enzimas agem como cola molecular, juntando -se ao gene de interesse no vetor.
2. Recombando DNA *
DNA ligase: Como mencionado acima, essa enzima é crucial para se juntar ao gene de interesse no vetor. Ele sela as lacunas entre os fragmentos de DNA, criando uma molécula de DNA recombinante estável.
Vamos quebrar o processo: 1.
Isolamento do DNA: O DNA contendo o gene de interesse é extraído de sua fonte (por exemplo, uma planta, animal ou célula bacteriana).
2.
Cortando o DNA: O DNA é tratado com enzimas de restrição específicas que cortam sequências precisas, gerando fragmentos contendo o gene alvo.
3.
preparando o vetor: O vetor escolhido (plasmídeo ou viral) também é cortado com a mesma enzima de restrição, criando um local compatível para inserir o gene.
4.
juntando -se ao gene e vetor: O fragmento do gene e o vetor aberto são misturados. A ligase de DNA se junta às extremidades do gene e do vetor, criando uma molécula de DNA recombinante.
5.
transformação/transfecção: A molécula de DNA recombinante é introduzida em uma célula hospedeira (por exemplo, bactérias). Esse processo é chamado de transformação (para bactérias) ou transfecção (para células eucarióticas).
6.
Seleção e replicação: As células hospedeiras que contêm o DNA recombinante são selecionadas e permitidas se multiplicar, produzindo muitas cópias do gene de interesse.
Nota importante: Esse processo é fundamental para a engenharia genética e a biotecnologia, permitindo -nos criar organismos com novas características ou produzir proteínas valiosas para aplicações médicas e industriais.