Princípio de funcionamento da eletroforese:
Eletroforese é uma técnica que separa as moléculas com base em sua carga
e
tamanho . Utiliza um campo elétrico
mover moléculas carregadas através de um gel
ou outra matriz .
Aqui está um colapso do princípio de trabalho:
1.
Preparação da amostra: A amostra que contém as moléculas a serem separadas é preparada em uma solução tampão adequada.
2.
gel ou matriz: A amostra é carregada em um gel ou outra matriz, como uma membrana ou papel poroso. O gel atua como uma peneira, permitindo que moléculas menores migrem mais rápido que as maiores. Os géis comuns incluem agarose para moléculas maiores, como DNA e poliacrilamida, para moléculas menores, como proteínas.
3.
aplicação de campo elétrico: Um campo elétrico é aplicado em todo o gel, com uma extremidade sendo carregada positivamente (ânodo) e a outra extremidade sendo carregada negativamente (cátodo).
4.
Migração: As moléculas carregadas dentro da amostra migrarão em direção ao eletrodo com a carga oposta. Por exemplo, moléculas carregadas negativamente se moverão em direção ao ânodo (eletrodo positivo), enquanto as moléculas carregadas positivamente se moverão em direção ao cátodo (eletrodo negativo).
5.
Separação: A taxa de migração depende da carga, tamanho e força da molécula do campo elétrico.
*
cobrança: Moléculas altamente carregadas migram mais rapidamente do que as moléculas menos carregadas.
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Tamanho: As moléculas menores se movem através da matriz de gel mais facilmente do que as moléculas maiores.
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força do campo elétrico: Um campo elétrico mais forte leva a uma migração mais rápida.
6.
Visualização e análise: As moléculas separadas são então visualizadas usando várias técnicas, como coloração ou corantes fluorescentes. As bandas resultantes são analisadas para determinar o tamanho e a quantidade das moléculas presentes na amostra.
Pontos -chave a serem lembrados: *
Tipos de eletroforese: Existem vários tipos de eletroforese, cada um adaptado para aplicações e moléculas específicas. Alguns tipos comuns incluem:
* Eletroforese em gel: Separa moléculas com base no tamanho e carga através de uma matriz de gel.
* Eletroforese capilar: Separa as moléculas em um tubo capilar estreito preenchido com uma solução tampão.
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foco isoelétrico: Separa proteínas com base em seu ponto isoelétrico (PI).
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Aplicações: A eletroforese é amplamente utilizada em vários campos:
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Biologia molecular: Analisando DNA, RNA e proteínas.
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medicamento: Diagnosticando doenças e monitoramento do tratamento.
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forense: Analisando amostras de DNA em investigações criminais.
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ciência alimentar: Analisar composição e qualidade alimentar.
Ao entender o princípio de trabalho da eletroforese, os pesquisadores podem alavancar essa técnica poderosa para analisar e separar moléculas para uma ampla gama de propósitos científicos e práticos.