O clorofórmio é
não usado em técnicas modernas de extração de DNA.
Historicamente , clorofórmio foi usado como parte de uma extração
fenol-clorofórmio método. Aqui está como funcionou:
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lise celular: O primeiro passo envolveu quebrar as células para liberar o DNA.
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fenol: O fenol foi então adicionado à mistura. O fenol é um desnaturante forte que separa as proteínas do DNA.
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clorofórmio: O clorofórmio foi adicionado para criar um sistema bifásico
, significando duas camadas formadas. A camada superior continha a solução aquosa com o DNA, enquanto a camada inferior continha o fenol e as proteínas desnaturadas.
Por que a clorofórmio não é mais usada: *
Segurança: O clorofórmio é um composto tóxico e carcinogênico, representando um risco significativo para os pesquisadores.
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Eficiência: Métodos modernos, como colunas de rotação ou extração baseada em contas magnéticos, são muito mais rápidos, mais fáceis e seguros que os métodos de fenol-clorofórmio. Essas técnicas dependem de diferentes princípios para isolar o DNA.
em vez de clorofórmio, a extração moderna de DNA usa: *
buffers: Os tampões são usados para criar a concentração correta de pH e sal nas células de lisão e separar o DNA de outros componentes celulares.
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enzimas: Enzimas como a proteinase K são usadas para digerir proteínas, separando ainda mais o DNA de outros componentes celulares.
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colunas de rotação ou contas magnéticas: Esses materiais se ligam ao DNA, permitindo seu isolamento e purificação do restante da amostra.
Em resumo, embora o clorofórmio tenha sido usado na extração de DNA, ela não é mais considerada um método seguro ou eficiente. As técnicas modernas de extração de DNA utilizam métodos alternativos para obter os mesmos resultados com maior segurança e facilidade.