75% de etanol é usado na extração de RNA, mas não é o reagente principal para o processo de extração. É um componente crucial nas etapas de precipitação e lavagem .

Aqui está o porquê:

* precipitação de RNA: O etanol ajuda a precipitar o RNA da solução. O RNA é muito solúvel em água, mas quando o etanol é adicionado, reduz a solubilidade do RNA, fazendo com que ele saia da solução como um precipitado sólido.
* lavar as impurezas: Durante a etapa de lavagem, o etanol ajuda a remover contaminantes, como sais, proteínas e outros detritos celulares que podem estar presentes na amostra de RNA.

como funciona:

1. desidratação: O etanol é um agente desidratante, o que significa que remove a água da solução. Essa redução no teor de água reduz a solubilidade do RNA, levando à precipitação.
2. Efeito de sal: Na maioria dos protocolos de extração de RNA, uma solução salina como acetato de sódio é adicionada antes do etanol. Esse sal ajuda a neutralizar a carga negativa da molécula de RNA, tornando -o menos solúvel em água e mais propenso a precipitar.
3. Seletividade: Enquanto o etanol precipita o RNA, ele não precipita o DNA com a eficiência. Isso ajuda a garantir que a amostra final de RNA esteja relativamente livre de contaminação do DNA.

Considerações importantes:

* concentração de etanol: A concentração de etanol usada na extração de RNA é crucial. A concentração muito baixa pode não ser eficaz na precipitação do RNA, enquanto uma concentração muito alta pode levar à precipitação de outros componentes indesejados. O etanol a 75% é comumente usado porque fornece um equilíbrio ideal para precipitação e lavagem.
* Temperatura: A precipitação de etanol é tipicamente realizada em baixas temperaturas, geralmente em gelo ou a 4 ° C, para minimizar a degradação do RNA.

No geral, 75% de etanol desempenha um papel crítico na extração de RNA, precipitando o RNA da solução e lavando contaminantes, garantindo o isolamento do RNA puro e intacto.