endpoint vs. ensaios cinéticos na bioquímica

Os ensaios terminais e cinéticos são usados ​​para medir a atividade de enzimas ou outros processos bioquímicos. Eles diferem em quando Eles medem a formação do produto e o que informações que eles fornecem.

ensaio de terminal:

* Medição: Tomado no final da reação, após a reação atingir a conclusão ou o equilíbrio.
* Informações: Fornece um único ponto de dados que reflete o valor final de produto formado.
* Vantagens: Simples, rápido e muitas vezes mais barato de executar.
* Desvantagens: Menos informativo do que ensaios cinéticos. Não revela informações sobre a taxa de reação ou a cinética enzimática.

ensaio cinético:

* Medição: Tomado várias vezes Durante a reação, permitindo o monitoramento da formação do produto ao longo do tempo.
* Informações: Fornece uma taxa da formação de produtos (por exemplo, alteração na absorvância por minuto), que pode ser usada para calcular:
* Velocidade inicial: A taxa da reação no início, quando a concentração do substrato é alta e a formação do produto é linear.
* parâmetros cinéticos enzimáticos: KM, VMAX e KCAT, que descrevem a afinidade da enzima pelo substrato e sua eficiência catalítica.
* Vantagens: Mais informativo, fornece informações sobre a cinética enzimática, permite uma análise mais detalhada do mecanismo de reação.
* Desvantagens: Mais complexo, requer equipamento especializado (por exemplo, espectrofotômetro) e pode ser mais demorado.

Exemplo:

* Ensaio de terminal para uma hidrolase: Meça a concentração final do produto hidrolisado (por exemplo, usando um reagente colorimétrico).
* ensaio cinético para uma hidrolase: Monitore continuamente a alteração na absorvância ao longo do tempo à medida que o substrato é hidrolisado, permitindo o cálculo da velocidade inicial.

em resumo:

* Ensaios de ponto de extremidade são adequados para medições rápidas e simples da concentração final do produto.
* ensaios cinéticos são mais adequados para estudar a taxa da reação e entender a cinética enzimática.

A escolha do ensaio depende da questão de pesquisa específica e das informações necessárias.