O detergente líquido usado na extração de DNA genômico é geralmente um detergente suave e não iônico, como Dodecil Sulfato de Sódio (SDS) ou Triton X-100. No contexto da extracção de ADN genómico, a função principal do detergente líquido é lisar as células e libertar o conteúdo celular, incluindo o ADN genómico, no tampão de extracção. Aqui está uma explicação detalhada de seu papel no processo de extração:
1. Lise Celular:Os detergentes líquidos são moléculas anfipáticas, o que significa que possuem regiões hidrofílicas (que gostam de água) e hidrofóbicas (que odeiam água). As regiões hidrofóbicas das moléculas de detergente interagem e rompem a bicamada lipídica da membrana celular, fazendo com que ela se dissolva e se separe. Isto leva à lise, ou ruptura, das células e à libertação do seu conteúdo intracelular no tampão de extracção circundante.
2. Solubilização de Componentes Celulares:Após a lise celular, os componentes intracelulares, incluindo proteínas, lipídios e ácidos nucleicos, são liberados no tampão de extração. Porém, esses componentes podem permanecer associados entre si, formando complexos ou agregados que podem dificultar a extração eficiente do DNA. O detergente líquido ajuda a solubilizar estes complexos, interrompendo as interações entre diferentes moléculas e promovendo a sua dispersão no tampão. Esta etapa de solubilização é crucial para garantir a liberação eficiente e a acessibilidade do DNA genômico.
3. Desnaturação de Proteínas:Além de lisar células e solubilizar componentes celulares, o detergente líquido também contribui para a desnaturação de proteínas durante a extração de DNA. As proteínas podem se ligar e interagir com o DNA, interferindo potencialmente no seu isolamento. O detergente interrompe essas interações proteína-DNA e desdobra as estruturas proteicas, garantindo que o DNA genômico permaneça livre em solução e acessível para etapas subsequentes de purificação.
4. Inibição de Desoxirribonucleases (DNases):Alguns detergentes líquidos, como o SDS, possuem uma propriedade adicional de inibir a atividade de desoxirribonucleases (DNases), que são enzimas que podem degradar o DNA. Este efeito inibitório ajuda a preservar a integridade do DNA genômico extraído, evitando sua degradação durante o processo de extração.
Vale a pena notar que o detergente líquido específico utilizado na extração de DNA genômico pode variar dependendo do método de extração e das preferências de cada pesquisador. Embora SDS e Triton X-100 sejam normalmente utilizados, outros detergentes suaves com propriedades semelhantes também podem ser utilizados para este fim.
