A análise dos cromossomos dentro de um cariótipo envolve várias etapas e técnicas. Aqui está uma visão geral de como os cromossomos são analisados no cariótipo:
1. Preparação da amostra: - Amostras de sangue ou outros tecidos são coletadas do indivíduo.
- Os glóbulos brancos são isolados da amostra.
- As células são cultivadas em laboratório para estimular a divisão celular.
2. Coleta e fixação de células: - Na fase apropriada da divisão celular (metáfase), as células são colhidas e tratadas com uma solução hipotónica para intumescê-las.
- As células inchadas são então fixadas com um fixador, normalmente uma mistura de produtos químicos como metanol e ácido acético, para preservar as estruturas celulares.
3. Preparação de slides: - Células fixas são colocadas em lâminas de microscópio e espalhadas para criar uma monocamada de cromossomos.
- As lâminas são secas ao ar ou aquecidas para aumentar a aderência dos cromossomos à superfície do vidro.
4. Coloração: - Uma técnica de coloração, como Giemsa ou tripsina-Giemsa, é usada para colorir os cromossomos.
- As manchas ligam-se a regiões específicas dos cromossomas, permitindo a identificação de padrões de bandas característicos.
5. Padrões de faixas: - Os padrões de bandas nos cromossomos são únicos para cada par de cromossomos e fornecem uma representação visual da estrutura e organização dos cromossomos.
- Esses padrões são usados para identificação e análise de cromossomos.
6. Cariótipo: - Os cromossomos corados são dispostos e organizados em um formato padrão de acordo com seu tamanho, formato e padrões de bandas.
- Este arranjo organizado cria um cariótipo, que é essencialmente uma representação fotográfica do complemento cromossômico de um indivíduo.
7. Análise cromossômica: - Os cariótipos são examinados ao microscópio por citogeneticistas ou outros profissionais treinados.
- Eles analisam o número, a estrutura e quaisquer anormalidades nos cromossomos.
- Variações numéricas ou estruturais específicas (por exemplo, duplicações, exclusões, translocações) podem ser detectadas e estudadas com maior detalhe.
8. Marcadores Genéticos e FISH: - Técnicas especializadas como a hibridação fluorescente in situ (FISH) podem ser utilizadas para investigar loci genéticos específicos ou identificar rearranjos cromossómicos.
- FISH envolve o uso de sondas fluorescentes que se ligam a sequências específicas de DNA, permitindo a visualização de regiões cromossômicas específicas ou genes de interesse.
9. Interpretação e Relatórios: - Com base na análise do cariótipo e nas técnicas adicionais utilizadas, é gerado um relatório citogenético.
- O relatório descreve os achados cromossômicos, identifica quaisquer anomalias ou variações cromossômicas e fornece informações relevantes para aconselhamento genético, diagnóstico e tratamento de doenças genéticas.
É importante observar que a análise do cariótipo é um campo especializado e a interpretação de anomalias cromossômicas requer experiência e conhecimento da genética e citogenética humana.
