Se você precisa ou não desgasificar ou desaerar, sua solução de buffer dependerá de sua aplicação. Se a presença de excesso de oxigênio no tampão afetará a reação química que você está procurando, ou se a formação de bolhas de ar na solução afetará as leituras ou o fluxo, você terá que desgaseificar seu buffer. Este artigo pressupõe que você já tenha preparado o seu buffer e filtrado, se necessário.

Vacuum

Desgaseificação por vácuo é a maneira mais comum de remover o ar de uma solução tampão. Coloque sua solução em um frasco de braço lateral com uma barra de agitação e use uma rolha de borracha para selar o topo. Coloque o frasco em uma placa de agitação e vire a placa para que a barra de agitação esteja girando a uma velocidade média. Isso ajuda a tirar o ar da solução. Conecte a mangueira do sistema de vácuo ao braço lateral do frasco e ligue o vácuo a uma taxa baixa. Permitir que a solução desgaseifique por pelo menos uma hora.

Vácuo com Sonication

Usando a mesma configuração com o frasco de braço lateral e vácuo, você pode omitir a placa de agitação e agitar a barra e colocar o frasco em um sonicador. O sonicador usa ondas sonoras que liberam mais ar da solução do que a barra de agitação.

Pulverização de hélio

Pulverização de hélio - também chamada de borbulhamento de hélio ou purga de gás inerte - é uma das as formas mais eficazes de desgaseificar seu buffer se você tiver uma linha de hélio em seu laboratório. Coloque uma frita de aspersão - um conector que tenha um filtro semelhante a uma pedra no final - na extremidade da linha de hélio e coloque a linha e a frita na sua solução. Ligue o hélio a uma pressão muito baixa por cerca de cinco minutos para permitir que o hélio remova o oxigênio. Isso pode ter que ser repetido diariamente.

Inline Degassers

Alguns sistemas de cromatografia terão um desgaseificador de solução em linha. O sistema removerá o gás do seu buffer antes de ser enviado pela coluna de cromatografia. Você não tem que desgasta sua solução de antemão. No entanto, se você está experimentando um ruído de linha de base em seu cromatograma, você deve considerar a desgaseificação usando um dos métodos acima, além de usar o desgaseificador em linha.