Desenvolvimento de novo teste de tira imunocromatográfica de fluxo lateral baseado em nanocorpos para detecção rápida de interferon humano recombinante α2b. Crédito:Jornal de Análise Farmacêutica
Os interferons são proteínas que constituem uma parte importante de nossos sistemas naturais de defesa. Estas proteínas também exibem uma atividade antiviral notável. O interferon humano recombinante α2b (rhIFNα2b) foi aprovado pela U.S. Food and Drug Administration em 1986. Ele tem sido usado desde então como agente antiviral para o tratamento da hepatite B e hepatite C. questão:a detecção de rhIFNα2b é tediosa e demorada.
Nesse contexto, pesquisadores da China, em um novo estudo, desenvolveram recentemente um novo método para a detecção rápida e eficiente de rhIFNα2b. Este artigo foi disponibilizado on-line em 8 de julho de 2021 e publicado no
Journal of Pharmaceutical Analysis em 30 de abril de 2022.
Para desenvolver seu novo método, eles imobilizaram um novo nanocorpo em uma tira de papel. O nanocorpo usado neste método foi originalmente derivado de uma alpaca – uma espécie de mamífero camelídeo sul-americano. Posteriormente, foi gerado no laboratório de pesquisa por meio da tecnologia do DNA recombinante – técnica utilizada para subclonar fragmentos de DNA para obter grandes quantidades de proteínas sintéticas. Isso geralmente é alcançado usando bactérias ou outras células procarióticas. Um nanocorpo é um fragmento funcional de um anticorpo maior. Como o novo nanocorpo imobilizado se liga firmemente ao rhIFNα2b e com alta especificidade, ele foi usado para uma detecção rápida e infalível de rhIFNα2b.
De acordo com o Dr. Junzhi Wang, "Devido às vantagens dos nanocorpos na preservação de reagentes, produção e custo, o ensaio de imunocromatografia de fluxo lateral usando nanocorpos tem um alto potencial para substituir os ensaios tradicionais de ligação de ligantes baseados em anticorpos para um teste de identificação rápida de terapia de proteína recombinante."
A equipe de pesquisa caracterizou a ligação para a interação I22-rhIFNα2b, ou seja, ligação entre o nanocorpo 122 e rhIFNα2b, usando uma plataforma Octet. Os dados obtidos indicaram claramente uma forte ligação. A especificidade de ligação foi ainda validada usando Western blotting, uma técnica usada para detectar proteínas usando anticorpos específicos para proteínas.
"Os produtos rhIFNα2b atualmente disponíveis na China incluem injeções, pós de injeção, géis e pastas. As tiras de imunocromatografia só podem ser usadas para avaliar líquidos ou produtos em forma de pó que podem ser dissolvidos e aplicados nas tiras. Isso porque o produto precisa difundir ao longo da tira por ação capilar; géis e pastas não atendem a esse requisito", explica o Dr. Wang.
Curiosamente, o ensaio de detecção de rhIFNa2b desenvolvido tem um limite de detecção de 1 µg/mL, que é inferior aos limites existentes. Isso a torna uma técnica baseada em laboratório mais sensível para identificação rápida de rhIFNα2b. Outra grande vantagem é o uso de nanocorpos para detecção de proteínas. Isso ocorre porque os nanocorpos podem ser obtidos de maneira econômica pela colheita de células bacterianas baratas. Além disso, grandes volumes de nanocorpos podem ser obtidos com relativa facilidade usando técnicas laboratoriais rotineiramente usadas.
Dr. Wang diz:"O tempo de operação da identificação de rhIFNα2b foi reduzido de dois dias para alguns minutos com nosso teste. Ele pode, portanto, atender às necessidades de detecção rápida desta família de produtos de proteínas recombinantes no mercado e fornecer uma boa base para melhorar a eficiência da detecção de falsificações no mercado. No futuro, a detecção rápida poderá ser realizada de maneira completa."
Em resumo, o método recém-desenvolvido pode abrir caminho para uma detecção mais suave, rápida e precisa de proteínas recombinantes ou geradas artificialmente, facilitando o diagnóstico e o tratamento precoce da hepatite.
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