Os íons cálcio e EDTA sofrem uma reação de complexação para formar um complexo estável cálcio-EDTA. Esta reação pode ser representada como:

Ca²⁺ + EDTA⁴⁻ ⇌ CaEDTA²⁻

A constante de equilíbrio para esta reação é muito grande, indicando que a reação prossegue quase até o fim. Isto significa que quase todos os íons de cálcio em uma solução serão complexados com EDTA se houver EDTA suficiente.

A complexação do cálcio pelo EDTA é importante em muitas aplicações biológicas e industriais. Por exemplo, o EDTA é usado como agente quelante para remover íons de cálcio da água e também é usado na medicina para tratar doenças como hipercalcemia (níveis elevados de cálcio no sangue).