Na titulação do tiossulfato de sódio com iodo, a mudança de cor ocorre devido à reação entre essas duas substâncias. O ponto final da titulação é alcançado quando todo o tiossulfato tiver reagido com o iodo. Neste ponto, a solução será incolor. No entanto, se mais iodo for adicionado após o ponto final ter sido atingido, a solução ficará azul devido à formação de íons triiodeto.

A reação entre tiossulfato e iodo pode ser representada pela seguinte equação:

2S2O3^2- + I2 → S4O6^2- + 2I^-

No final da titulação, todo o tiossulfato reagiu com o iodo, então não haverá mais íons S2O3^2- na solução. Isto significa que qualquer iodo adicional adicionado não reagirá com o tiossulfato e, em vez disso, permanecerá em solução como moléculas de I2. Estas moléculas I2 irão absorver luz no espectro visível, dando à solução uma cor azul.

A formação de íons triiodeto pode ser representada pela seguinte equação:

I2 + I- → I3^-

Os íons I3- também são responsáveis ​​pela cor azul da solução.