No tratamento de tumores, o microambiente desempenha um papel importante. Freqüentemente, contém células do sistema imunológico que estão tão alteradas que promovem o crescimento do tumor. No jornal Angewandte Chemie , os cientistas introduziram um método pelo qual as amostras de células de tumores e seus arredores podem rapidamente (menos de 1 hora) passar por um ciclo de coloração, destaining, e, em seguida, restaura-se com anticorpos fluorescentes - por meio da ligação de um "inibidor de buraco negro" (inibidor de fluorescência) por meio de "química de clique".

Para combater um tumor de forma eficaz e precisa, é importante caracterizar especificamente não apenas as células do tumor, mas também aquelas em seu microambiente, incluindo células imunes infiltrantes de tumor. Até agora, análises dessas mudanças dinâmicas com biópsias convencionais e seções de tecido podem levar dias a semanas, ou não ocorrem antes do tratamento. Um método alternativo é a aspiração por agulha fina, em que apenas alguns milhares de células são retiradas de diferentes partes de um tumor e seus arredores. Este método apresenta poucos riscos e é mais rápido porque não requer incorporação ou seccionamento. Contudo, para obter uma estimativa representativa das populações de células imunes no microambiente do tumor, muitas manchas diferentes devem ser realizadas. Como o número de células é tão pequeno, isso significa que a mesma amostra deve ser corada repetidamente, destinado, e manchado novamente. Contudo, as células são muito delicadas para o convencional, severa descoloração, e os procedimentos demorariam muito.

Uma equipe chefiada por Jonathan Carlson e Ralph Weissleder no Massachusetts General Hospital Research Institute e na Harvard Medical School (Boston, MA, EUA) desenvolveu agora um ultrarrápido, altamente eficiente, e método cíclico suave para perfil de proteína multiplexada de células individuais, o que permite várias colorações diferentes. Em vez de separar a tintura ou branquear, a fluorescência da mancha é simplesmente "desligada" com um supressor de buraco negro. Os supressores de buracos negros absorvem a energia de um corante fluorescente em todo o espectro visível e o convertem em calor assim que se aproximam o suficiente. Isso desliga o brilho do corante.

O método é assim:usando um conector que contém um grupo trans-cicloocteno, um corante fluorescente é ligado a anticorpos que reconhecem especificamente as moléculas marcadoras características das células. Se o marcador de destino estiver em uma determinada amostra, o anticorpo liga-se a ele e a fluorescência pode ser detectada. Em seguida, o inibidor carregando um grupo tetrazina é adicionado. Usando este grupo tetrazina e o trans-cicloocteno, o supressor pode simplesmente ser anexado ao ser "clicado" como se fosse um estalo (daí o termo química de clique para este tipo de reação). O inibidor é, portanto, especificamente no local e muito rápida e eficientemente trazido para perto do corante, extinguindo imediatamente sua fluorescência. A rapidez dessa reação de clique é notável, executando ordens de magnitude mais rápido do que o esperado. A razão para isso pode ser a forte interação entre o corante de fluorescência e o supressor.

O próximo anticorpo fluorescente pode ser aplicado imediatamente após a extinção de fluorescência. Os pesquisadores foram capazes de corar doze moléculas marcadoras diferentes em uma amostra em uma hora. Isso torna possível caracterizar rapidamente as populações de células imunes em tumores para selecionar os tratamentos mais adequados.