As soluções de tampão resistem a alterações no pH porque contêm conjugados ácido-base fracos que neutralizam os íons H + e OH-. As soluções tampão consistem em ácidos ou bases fracas e no sal desse ácido ou base. A seleção de um sistema de buffer apropriado depende do intervalo de pH para o buffering. A maioria das reações biológicas ocorre em uma faixa de pH de 6 a 8. Tampão de buffers de fosfato na faixa de pH de 6,5 a 7,5. Os tampões de ácido carboxílico são úteis a partir de pH 3 a 6. Os tampões de borato funcionam a partir de pH 8,5 a 10. Os tampões de aminoácidos, tais como glicina e histidina, desempenham-se numa diversidade de gamas de pH. O buffer Tris é um dos sistemas buffer mais usados ​​nos laboratórios de biologia. Cálculos para uma solução tampão Tris serão usados ​​no exemplo a seguir, mas a metodologia se aplica a qualquer solução tampão.

Use o produto da molaridade e volume da solução final para determinar os moles de base necessários. Por exemplo, se 2 litros de uma solução 0,1 M de tampão Tris são necessários, então o número de moles de Tris requerido é:

0,1 moles /litro x 2 litros = 0,2 moles de Tris base e

Calcule a massa de tampão requerida pela multiplicação do número de moles necessários pelo peso molecular da base. Por exemplo, a massa de 0,2 mols de base Tris é igual a:

0,2 mole Tris x 121,1 g /mole Tris = 24,22 g Tris

Meça a massa apropriada de base em uma escala. >

Dissolva a base em água destilada usando uma barra de agitação magnética e mexendo a placa quente. Dissolvê-lo em um volume de água apenas um pouco menor que o volume final da solução (950 a 975 mL para cada litro de solução final). O pH do tampão Tris muda com a concentração e precisa de reajuste se um volume inicial for muito pequeno. Também é melhor preparar o tampão na mesma temperatura em que será usado durante o ensaio ou experimento, pois o Tris possui grandes variações no pH dependentes da temperatura.

Titule a solução aquosa de Tris com ácido clorídrico 1 M usando um pH. meter

Traga a solução para o volume final com água destilada em um balão volumétrico.

Dica

Para economizar tempo ao preparar uma solução de buffer, você pode usar concentrados de buffer pré-fabricados no pH requerido e diluído para a molaridade e volume desejados.

Prepare a solução tampão na mesma temperatura que será usada para evitar mudanças significativas no pH.

Evite ajustes de pH demorados, titule somente após diluindo até a concentração desejada. Dissolver em um volume muito pequeno levará a titulações repetidas.

Aviso

Tenha cuidado ao manusear ácidos e bases.

Use óculos de proteção.