O teste geral mais comum e amplamente utilizado para a proteína é o teste de biureto
. Aqui está como funciona:
1. O princípio: * O teste de biureto depende da reação entre os íons de cobre (Cu²⁺) em uma solução alcalina com ligações peptídicas encontradas em proteínas.
* As ligações peptídicas são as ligações entre aminoácidos, que compõem proteínas.
* Quando os íons de cobre se ligam às ligações peptídicas, eles formam um complexo que absorve a luz em um comprimento de onda específico, produzindo uma mudança de cor distinta.
2. Procedimento: *
Adicione uma pequena quantidade da amostra desconhecida (líquido ou sólido) a um tubo de teste. *
Adicione algumas gotas de reagente de biureto à amostra. O reagente de biureto é uma solução contendo sulfato de cobre e hidróxido de sódio.
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Misture o conteúdo do tubo de ensaio suavemente. *
Observe a mudança de cor. 3. Interpretação de resultado: *
Resultado positivo: Se a solução girar
violeta ou roxo , indica a presença de proteínas.
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Resultado negativo: Se a solução permanecer azul ou não mostrar mudança de cor significativa, sugere a ausência de proteínas.
4. Limitações: * O teste de biureto não é específico para proteínas e também pode fornecer um resultado positivo para compostos contendo ligações peptídicas, como peptídeos e algumas outras moléculas.
* O teste pode não ser sensível o suficiente para detectar concentrações muito baixas de proteínas.
5. Outros testes de proteína: Enquanto o teste de biuret é amplamente utilizado, outros testes de proteína também estão disponíveis, como:
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teste de ninidrina: Detecta a presença de aminoácidos, que são os blocos de construção de proteínas.
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teste xanthoproteico: Detecta a presença de aminoácidos aromáticos, como tirosina e triptofano.
* Teste de Millon: Detecta a presença de tirosina, um aminoácido encontrado em muitas proteínas.
A escolha do teste depende da proteína específica que está sendo investigada e do nível desejado de sensibilidade.