O ácido ascórbico, também conhecido como vitamina C, desempenha diversas funções na extração de DNA. Aqui estão suas principais funções:
1. Antioxidante:O ácido ascórbico é um potente antioxidante que ajuda a proteger o DNA dos danos oxidativos. Durante os procedimentos de extração de DNA, vários reagentes e fatores ambientais podem gerar espécies reativas de oxigênio (ROS) que podem causar oxidação do DNA e quebra da cadeia. O ácido ascórbico elimina esses radicais livres e minimiza os danos ao DNA, preservando assim a integridade do material genético extraído.
2. Agente redutor:O ácido ascórbico sofre reações redox e atua como agente redutor na extração de DNA. Ajuda a manter o ambiente redutor necessário para alguns métodos de extração de DNA, particularmente aqueles que envolvem o uso de certos tampões de lise ou agentes quelantes. Ao reduzir os agentes oxidantes presentes nos tampões de extração, o ácido ascórbico evita a oxidação do DNA e facilita a sua extração eficaz.
3. Inibição de nucleases:Nucleases são enzimas que podem degradar o DNA, comprometendo potencialmente o rendimento e a qualidade do DNA extraído. O ácido ascórbico possui efeitos inibitórios sobre algumas nucleases, como DNases e RNases. Ao inibir a atividade destas nucleases, o ácido ascórbico ajuda a preservar a integridade das moléculas de DNA durante o processo de extração, reduzindo o risco de degradação do DNA.
4. Aumento da precipitação do DNA:O ácido ascórbico pode aumentar a precipitação do DNA após a extração. Isto é particularmente relevante em métodos que empregam precipitação com álcool para isolar DNA. O ácido ascórbico promove a formação de precipitados de DNA densos e compactos, facilitando a coleta do pellet de DNA durante a centrifugação. Isto facilita as etapas subsequentes de purificação de DNA e aplicações posteriores.
No geral, o ácido ascórbico contribui para a proteção, estabilização e extração eficiente do DNA, agindo como antioxidante, agente redutor, inibidor de nuclease e intensificador de precipitação. Sua inclusão em protocolos de extração de DNA ajuda a garantir a integridade e a qualidade do material genético extraído para diversas aplicações de biologia molecular.