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    Novo avanço na fixação biológica de nitrogênio em arroz

    Expressão de OsNifH derivado de arroz Ht e OsNifM Av . Níveis de expressão de mRNA relativos de OsnifH Ht e OsnifM Av em três diferentes (replicações biológicas independentes) linhas de plantas de arroz (a) e as linhas de calo correspondentes (b). Os dados (normalizados para mRNA de OsActin) são médias ± SD (n = 3 réplicas técnicas). Análise de imunotransferência de extratos de proteínas solúveis de folhas de arroz (c) e calos (d) sondados com anticorpos contra NifH, NifM e o Strep-tag. Anticorpos contra RuBisCO foram usados ​​como controle de carga para linhas de plantas. A coloração de Ponceau foi utilizada como controle de carga para extratos de calo devido à baixa expressão de RuBisCO. A pista Ctrl mostra calos não transformados e linhas de plantas. e Expressão estável de OsNifH Ht na geração segregante T1 da linhagem de plantas de arroz HtH200. Extrato de proteína de calo expressando OsNifH Ht (linha HtH206) foi usado como controle positivo (Pos ctrl). Imunotransferências não cortadas são mostradas nas Figs Suplementares. 6-10. f Fenótipo de OsNifH Ht expressando progênie T1 mostrando crescimento e desenvolvimento normais. Crédito:Biologia da Comunicação (2022). DOI:10.1038/s42003-022-03921-9

    Pesquisadores do Centro de Biotecnologia e Genômica Vegetal (CBGP, UPM-INIA), em colaboração com a Universidade de Lleida-Agrotecnio e a Instituição Catalã de Pesquisa e Estudos Avançados (ICREA), conseguiram produzir os primeiros cereais transgênicos que expressam duas componentes-chave da nitrogenase, a enzima que fixa o nitrogênio atmosférico convertendo-o em amônia.
    Cada componente foi produzido em uma linha de planta transgênica separada e mostrou ser biologicamente ativo in vitro ou em plantas vivas. Essas plantas transgênicas ainda não podem fixar seu próprio nitrogênio porque componentes adicionais são necessários para reconstruir a enzima nitrogenase completa, mas o trabalho é inovador porque demonstra pela primeira vez que é possível expressar essas proteínas altamente sensíveis ao oxigênio de forma estável em plantas, e que as proteínas mantenham suas atividades.

    As culturas requerem nitrogênio para crescimento e produtividade porque é um componente importante do DNA, proteínas, clorofila e moléculas de armazenamento de energia, como trifosfato de adenosina (ATP). A maioria das plantações depende do fornecimento de nitrato e amônio de fertilizantes sintéticos industriais, mas mais da metade desses insumos permanecem não assimilados, transbordando ou lixiviando em rios e lagos como uma das principais fontes de poluição.

    Leguminosas como ervilhas e feijões abrigam bactérias que convertem gás nitrogênio diretamente em amônia usando uma enzima chamada nitrogenase. Este processo é conhecido como fixação biológica de nitrogênio. A introdução de genes de nitrogenase em plantas cultivadas forneceria o maquinário necessário para fixar nitrogênio de forma independente. No entanto, o processo é extremamente complexo porque muitas proteínas individuais diferentes são necessárias não apenas como componentes estruturais diretos da nitrogenase, mas também proteínas acessórias necessárias para sua montagem e fornecimento de energia. Os principais componentes proteicos também são extremamente sensíveis ao oxigênio.

    Os pesquisadores superaram esse gargalo crítico produzindo a dinitrogenase redutase funcional (proteína Fe, NifH) e o cofator nitrogenase maturase (NifB) em linhas de arroz transgênicas separadas. A pesquisa sobre a expressão da nitrogenase é geralmente conduzida em plantas modelo de laboratório. No entanto, ao focar no arroz, uma importante cultura básica que fornece a principal ou única fonte de calorias para mais de 2,5 bilhões de pessoas nos países em desenvolvimento, a importância e o impacto dos resultados dos estudos aumentam substancialmente.

    O principal investigador do projeto, Dr. Luis Rubio, diz:"Este é um grande avanço da bioengenharia, pois derruba dois obstáculos técnicos e mostra o caminho para fazer cereais fixadores de nitrogênio". A conquista remove uma das principais restrições que dificultam a fixação biológica de nitrogênio nas culturas e prepara o terreno para a montagem de um complexo de nitrogenase completo e funcional nas plantas.

    Trabalhos adicionais para estabelecer plantas contendo toda a nitrogenase teriam um impacto duradouro na segurança alimentar global. O Dr. Paul Christou, professor de pesquisa do ICREA e líder do projeto no Centro Agrotecnio da Universidade de Lleida, diz:"Um dos maiores impactos do trabalho a longo prazo será em países de baixa e média renda, que não podem pagar custos fertilizantes nitrogenados."

    A pesquisa relacionada foi publicada em Communications Biology e ACS Biologia Sintética . + Explorar mais

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